A1/Bfl-1 Antibody [N2F22] Datasheet

生物描述

特异性	A1/Bfl-1 Antibody [N2F22] 可检测内源性 A1/Bfl-1 总蛋白水平。
背景	A1/Bfl-1 (BCL2A1) 是 Bcl-2 蛋白家族的抗凋亡成员，最初在小鼠骨髓中被鉴定为粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 (GM-CSF) 诱导基因，主要在造血细胞（包括中性粒细胞、巨噬细胞、T 淋巴细胞和 B 淋巴细胞）中表达，在肺和血管内皮等非造血组织中的检测有限。 A1/Bfl-1 包含四个 Bcl-2 同源 (BH) 结构域，这些结构域组成八个 α 螺旋，其中 α4、α5 和 α6 螺旋分别对应于 BH3、BH1 和 BH2 结构域，在蛋白表面形成一个疏水沟槽，用于与促凋亡的 Bcl-2 家族成员相互作用。然而，A1 在该结合沟槽的第 78 位氨基酸残基具有独特的酸性谷氨酸残基，这使其相互作用特异性与其他抗凋亡蛋白有所区别。该蛋白在结构上与 Bcl-2、Bcl-xL、Bcl-w 和 Mcl-1 的不同之处在于其亲水性 C 端结构域，该结构域缺乏跨膜锚定结构，而是包含泛素化位点，可导致快速的蛋白酶体降解，使其半衰期仅为约 30 分钟，与 Mcl-1 相当，但与 Bcl-2 长达 24 小时的稳定性形成鲜明对比。 A1/Bfl-1 的表达可通过 NF-κB 转录激活迅速诱导，以响应多种炎症刺激，包括 TNF-α、IL-1β、CD40 配体结合、佛波酯、脂多糖以及通过 PLCγ/PKC/NF-κB 通路发挥作用的前 T 细胞受体信号传导，这使得 A1 成为一种即刻早期生存反应基因。该蛋白通过高亲和力结合并中和仅含 BH3 结构域的促凋亡蛋白（包括 Bid、Bim 和 Puma），同时不与 Bad 蛋白结合，从而阻止这些凋亡激活因子触发 Bax/Bak 寡聚化和线粒体外膜通透性增加，否则这些过程将导致细胞色素 c 释放并启动 caspase 依赖性凋亡。 A1/Bfl-1优先与Bak而非Bax相互作用，其直接结合可拮抗Bak介导的细胞死亡。然而，有报道指出，不同物种的A1/Bfl-1存在差异：小鼠A1主要定位于胞质，需要相互作用蛋白才能发挥其抗凋亡作用；而人A1/Bfl-1则优先靶向线粒体。该蛋白在淋巴细胞发育过程中发挥着关键的存活功能——A1表达在DN3向DN4胸腺细胞过渡期达到峰值，此时前TCR信号依赖的A1诱导对于β选择进程是必要且充分的；在CD4+单阳性胸腺细胞中，A1的表达水平比双阳性细胞高30倍；在T细胞受体激活后，外周T细胞中A1与Noxa共同显著上调，从而促进携带高亲和力TCR的抗原特异性克隆的存活。 A1/Bfl-1通过NF-κB激活，在B细胞受体和PLCγ2信号通路下游调控成熟滤泡B细胞的存活，使滤泡B细胞对BCR诱导的细胞凋亡具有抵抗力，从而避免在阴性选择过程中清除过渡性B细胞。系统性红斑狼疮患者的B细胞中A1表达升高，反映了免疫耐受机制的失调。该蛋白通过NF-κB依赖性转录，抑制G-CSF、GM-CSF、TNF-α、IFN-γ、IL-8和脂多糖刺激引起的自发性细胞凋亡，从而延长中性粒细胞在细菌感染和炎症反应中的存活时间。A1-a亚型的缺失会消除LPS介导的中性粒细胞存活增强作用，但由于代偿性祖细胞活性，稳态和炎症状态下的粒细胞数量仍保持正常。 A1/Bfl-1通过激活NF-κB通路促进巨噬细胞在感染牛分枝杆菌卡介苗、弓形虫和结核分枝杆菌期间的存活，该通路在感染后8至16小时内达到峰值。然而，矛盾的是，A1/Bfl-1抑制毒性结核分枝杆菌感染的巨噬细胞中自噬体的成熟和酸化，从而阻断自噬介导的杀伤作用和宿主细胞凋亡，使细菌得以在细胞内持续存在。A1与Mcl-1在肥大细胞存活方面具有功能冗余性，二者共同通过维持含有富含组胺的炎症颗粒的组织驻留肥大细胞的存活来介导过敏反应的严重程度。钙蛋白酶可水解切割A1/Bfl-1的N端区域，产生促凋亡的C端片段，这些片段可促进线粒体细胞色素c的释放并逆转细胞凋亡，这代表了一种潜在的治疗机制，尽管触发这种转化的生理条件仍未完全明确。与Bcl-2不同，A1/Bfl-1的过表达不会在转基因小鼠中诱发淋巴瘤，但当与显性失活的p53共表达时，抗泛素化的A1突变体易导致淋巴瘤发生，并加速Myc诱导的淋巴瘤发展；此外，在B细胞慢性淋巴细胞白血病、急性髓系白血病和急性早幼粒细胞白血病中，A1表达升高与化疗耐药性和不良预后密切相关。

特异性

A1/Bfl-1 Antibody [N2F22] 可检测内源性 A1/Bfl-1 总蛋白水平。

背景

A1/Bfl-1 (BCL2A1) 是 Bcl-2 蛋白家族的抗凋亡成员，最初在小鼠骨髓中被鉴定为粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 (GM-CSF) 诱导基因，主要在造血细胞（包括中性粒细胞、巨噬细胞、T 淋巴细胞和 B 淋巴细胞）中表达，在肺和血管内皮等非造血组织中的检测有限。 A1/Bfl-1 包含四个 Bcl-2 同源 (BH) 结构域，这些结构域组成八个 α 螺旋，其中 α4、α5 和 α6 螺旋分别对应于 BH3、BH1 和 BH2 结构域，在蛋白表面形成一个疏水沟槽，用于与促凋亡的 Bcl-2 家族成员相互作用。然而，A1 在该结合沟槽的第 78 位氨基酸残基具有独特的酸性谷氨酸残基，这使其相互作用特异性与其他抗凋亡蛋白有所区别。该蛋白在结构上与 Bcl-2、Bcl-xL、Bcl-w 和 Mcl-1 的不同之处在于其亲水性 C 端结构域，该结构域缺乏跨膜锚定结构，而是包含泛素化位点，可导致快速的蛋白酶体降解，使其半衰期仅为约 30 分钟，与 Mcl-1 相当，但与 Bcl-2 长达 24 小时的稳定性形成鲜明对比。 A1/Bfl-1 的表达可通过 NF-κB 转录激活迅速诱导，以响应多种炎症刺激，包括 TNF-α、IL-1β、CD40 配体结合、佛波酯、脂多糖以及通过 PLCγ/PKC/NF-κB 通路发挥作用的前 T 细胞受体信号传导，这使得 A1 成为一种即刻早期生存反应基因。该蛋白通过高亲和力结合并中和仅含 BH3 结构域的促凋亡蛋白（包括 Bid、Bim 和 Puma），同时不与 Bad 蛋白结合，从而阻止这些凋亡激活因子触发 Bax/Bak 寡聚化和线粒体外膜通透性增加，否则这些过程将导致细胞色素 c 释放并启动 caspase 依赖性凋亡。 A1/Bfl-1优先与Bak而非Bax相互作用，其直接结合可拮抗Bak介导的细胞死亡。然而，有报道指出，不同物种的A1/Bfl-1存在差异：小鼠A1主要定位于胞质，需要相互作用蛋白才能发挥其抗凋亡作用；而人A1/Bfl-1则优先靶向线粒体。该蛋白在淋巴细胞发育过程中发挥着关键的存活功能——A1表达在DN3向DN4胸腺细胞过渡期达到峰值，此时前TCR信号依赖的A1诱导对于β选择进程是必要且充分的；在CD4+单阳性胸腺细胞中，A1的表达水平比双阳性细胞高30倍；在T细胞受体激活后，外周T细胞中A1与Noxa共同显著上调，从而促进携带高亲和力TCR的抗原特异性克隆的存活。 A1/Bfl-1通过NF-κB激活，在B细胞受体和PLCγ2信号通路下游调控成熟滤泡B细胞的存活，使滤泡B细胞对BCR诱导的细胞凋亡具有抵抗力，从而避免在阴性选择过程中清除过渡性B细胞。系统性红斑狼疮患者的B细胞中A1表达升高，反映了免疫耐受机制的失调。该蛋白通过NF-κB依赖性转录，抑制G-CSF、GM-CSF、TNF-α、IFN-γ、IL-8和脂多糖刺激引起的自发性细胞凋亡，从而延长中性粒细胞在细菌感染和炎症反应中的存活时间。A1-a亚型的缺失会消除LPS介导的中性粒细胞存活增强作用，但由于代偿性祖细胞活性，稳态和炎症状态下的粒细胞数量仍保持正常。 A1/Bfl-1通过激活NF-κB通路促进巨噬细胞在感染牛分枝杆菌卡介苗、弓形虫和结核分枝杆菌期间的存活，该通路在感染后8至16小时内达到峰值。然而，矛盾的是，A1/Bfl-1抑制毒性结核分枝杆菌感染的巨噬细胞中自噬体的成熟和酸化，从而阻断自噬介导的杀伤作用和宿主细胞凋亡，使细菌得以在细胞内持续存在。A1与Mcl-1在肥大细胞存活方面具有功能冗余性，二者共同通过维持含有富含组胺的炎症颗粒的组织驻留肥大细胞的存活来介导过敏反应的严重程度。钙蛋白酶可水解切割A1/Bfl-1的N端区域，产生促凋亡的C端片段，这些片段可促进线粒体细胞色素c的释放并逆转细胞凋亡，这代表了一种潜在的治疗机制，尽管触发这种转化的生理条件仍未完全明确。与Bcl-2不同，A1/Bfl-1的过表达不会在转基因小鼠中诱发淋巴瘤，但当与显性失活的p53共表达时，抗泛素化的A1突变体易导致淋巴瘤发生，并加速Myc诱导的淋巴瘤发展；此外，在B细胞慢性淋巴细胞白血病、急性髓系白血病和急性早幼粒细胞白血病中，A1表达升高与化疗耐药性和不良预后密切相关。

使用信息

抗体应用

WB, IP

稀释比例

WB	IP
1:1000	1:100

反应性

Human

抗体类型

Rabbit Monoclonal Antibody

MW

18 kDa

储存液配方

PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3

储存条件
(自收到货起)

-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

实验方法

文献参考

Application Data

WB

Validated by Selleck

Lane 1: 293T, Lane 2: 293T (BCL2A1(human) transfected)