Androgen Receptor (M23G3) Rabbit mAb

目录号:F3234

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生物描述

特异性 Androgen Receptor (M23G3) Rabbit mAb 用于检测内源性 Androgen Receptor 总的蛋白水平。
背景 雄激素受体是一种细胞核受体及转录因子,介导雄激素(主要为睾酮和二氢睾酮 [DHT])的作用,在男性生殖发育、第二性征的形成及涵盖肌肉、骨骼、心血管系统和中枢神经系统等多个器官系统的广泛生理过程中发挥关键作用。从结构上看,AR包含N端结构域、DNA结合域和配体结合域,既通过基因组途径调控基因转录,又通过非基因组途径激活细胞内信号级联反应。AR功能异常与雄激素缺乏、前列腺癌、雄激素不敏感综合征 (AIS) 以及肯尼迪病等疾病相关,其活性还受CAG重复长度等遗传变异的影响。

使用信息

抗体应用 WB, IHC, IF, ChIP 稀释比例
WB IHC IF CHIP
1:1000 1:100 1:500 1:50
反应性 Human, Mouse, Rat
抗体类型 Rabbit MW 99 kDa
储存液配方 PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3
储存条件
(自收到货起)
-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years
IHC
实验步骤:
 
脱蜡/补液
1. 脱蜡/水合切片:
2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次,每次 5 分钟。
3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次,每次 10 分钟。
4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次,每次 10 分钟。
5. 用 dH2O 清洗切片两次,每次 5 分钟。
6.抗原修复:对于柠檬酸盐:将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中,在微波炉中加热,直至开始沸腾; 在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。 在工作台上冷却玻片 30 分钟。
 
染色
1. 用 dH2O 清洗切片 3 次,每次 5 分钟。
2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。
3. 用 dH2O 清洗切片两次,每次 5 分钟。
4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。
5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。
6. 除去封闭液,并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。
7. 去除抗体溶液,用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次,每次 5 分钟。
8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。 在加湿室中室温孵育 30 分钟。
9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次,每次 5 分钟。
10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。
11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。
12. 将载玻片浸入 dH2O 中。
13. 如果需要,用苏木精复染切片。
14. 用 dH2O 清洗切片两次,每次 5 分钟。
15. 切片脱水:95%乙醇孵育切片两次,每次 10 秒; 在 100% 乙醇中重复,孵育切片两次,每次 10 秒; 在二甲苯中重复,孵育切片两次,每次 10 秒。
22. 用盖玻片和封固剂封固切片。
 
IF

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