Angiotensin II Type 2 Receptor Rabbit mAb

目录号：F2225

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生物描述

特异性

Angiotensin II Type 2 Receptor Rabbit mAb 可检测内源性 Angiotensin II Type 2 Receptor 总的蛋白水平。
背景

血管紧张素 II 型 2 型受体 (AT2R) 是 G 蛋白偶联受体 (GPCR) 家族的成员，与刺激性 (Gαs) 或抑制性 (Gαi/o) 蛋白以及涉及 AT2R 结合蛋白的 G 蛋白非依赖性途径相关。其激活会触发酶，例如 SHP-1（含 SH2 结构域的磷酸酶 1）、MKP-1（丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶 1）和 PP2A（蛋白磷酸酶 2A），这些酶在信号通路中发挥重要作用。AT2R 通过减少炎症、改善心室功能、减少疤痕组织以及通过凋亡调控和细胞存活途径防止有害的心脏重塑，对心血管和肾脏保护至关重要。AT2R 的缺失会导致心力衰竭恶化，而适度的过表达会增强受伤后的心脏功能。其激活还与减少纤维化、改善肾小球滤过率 (GFR) 和减轻炎症，对糖尿病肾病等肾脏疾病特别有益。它通过降低 TNF-α 和 IL-6 等细胞因子并增加 IL-10 表现出抗炎作用，有助于调控免疫细胞，促进心脏和肾脏健康。它与 MasR 的相互作用有望用于 SARS-CoV-2 治疗，因为它可能抵消病毒引起的 ACE2 下调，从而恢复有利的 Ang (1–7)/MasR 信号通路。

使用信息

抗体应用 WB, IP 稀释比例
WB IP
1:1000 1:20
反应性 Human, Mouse, Rat
抗体类型 Rabbit MW 41 kDa
储存液配方 PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3
储存条件
(自收到货起)		 –20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years
WB
Western Blotting
 
样品制备
1. 吸去培养基,用1X PBS清洗细胞。
2. 加入1X SDS上样缓冲液裂解细胞,将提取物转移至微量离心管中。置于冰上。
3. 超声10–15秒,完成细胞裂解和DNA剪切。
4. 将20 µl样品在95–100°C加热5分钟,然后置于冰上冷却。
5. 离心5分钟(使用微量离心机)。
6. 将适量样品上样至SDS-PAGE凝胶(上样量取决于提取蛋白浓度)。注意:同时请上样预染分子量标准,以确定分子量并验证电转效果。
7. 电转至硝酸纤维素膜/PVDF膜。(湿转法参考条件: 150mA 90min)
 
膜封闭与抗体孵育
a. 封闭
1. (可选)转膜完成后,用TBS室温洗膜5分钟。
2. 将膜在封闭液中室温孵育1小时。
3. 用TBST洗涤3次,每次5分钟。
 
b. 抗体孵育
1. 将膜与一抗(按推荐的稀释度和稀释液配制)置于一抗稀释缓冲液中,4°C温和摇床过夜孵育。
2. 用TBST洗涤3次,每次5分钟。
3. 将膜与适当的二抗(稀释于封闭液中)在室温下温和摇床孵育1小时。
4. 用TBST洗涤3次,每次5分钟。
5. 进行检测。
 
显影检测
1. 抗体孵育结束后,用TBST洗膜3次,每次5分钟。
2. 配制ECL发光试剂(或根据二抗类型选择其他显色剂/底物)。混匀。
3. 将底物与膜孵育1分钟,去除多余溶液(膜保持湿润),置于显影仪中进行曝光。

Application Data

WB

Validated by Selleck

  • Lane 1: HepG2
    Lane 2: Human heart
    Lane 3: Mouse heart
    Lane 4: Rat heart