Anti-ATP-binding cassette sub-family A member 3 Mouse Antibody [F19C21]

目录号：F2545

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生物描述

特异性

Anti-ATP-binding cassette sub-family A member 3 Mouse Antibody [F19C21] 可检测内源性 ATP-binding cassette sub-family A member 3 总蛋白水平。
背景 ATP结合盒亚家族A成员3 (ABCA3) 是ABC转运蛋白超家族中高度保守的多次跨膜糖蛋白，它利用ATP水解将磷脂转运到肺泡II型细胞的板层体(LB)中，肺表面活性物质在此组装和储存。ABCA3的结构相似，由两个半体组成，每个半体包含六个跨膜结构域和一个胞质核苷酸结合结构域(NBD)，该结构域包含Walker A、Walker B和ABCA特异性标记基序，此外还包含两个位于Asn124和Asn140位点的N连接糖基化位点，这两个位点对于正确折叠、稳定性和LB靶向性至关重要。尽管ABCA3在多种组织中表达，但它在肺中高度富集，对LB的生物合成和表面活性物质稳态至关重要，尤其是在运输磷脂酰胆碱、磷脂酰甘油和胆固醇方面。ABCA3基因突变可导致运输或功能缺陷，从而导致新生儿表面活性物质缺乏、间质性肺病和致命的呼吸窘迫。

使用信息

抗体应用 IHC 稀释比例
IHC
1:10
反应性 Mouse, Rat
抗体类型 Mouse MW
储存液配方 PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3
储存条件
(自收到货起)		 -20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years
IHC
实验步骤：
 
脱蜡/补液
1. 脱蜡/水合切片：
2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。
3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。
4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。
5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾； 在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。 在工作台上冷却玻片 30 分钟。
 
染色
1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。
2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。
3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。
5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。
6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。
7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。 在加湿室中室温孵育 30 分钟。
9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。
11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。
12. 将载玻片浸入 dH2O 中。
13. 如果需要，用苏木精复染切片。
14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒； 在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒； 在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。
16. 用盖玻片和封固剂封固切片。
 

Application Data

IHC

Validated by Selleck

  • Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded mouse lung tissue with F2545 at 1:100 dilution.

IHC

Validated by Selleck

  • Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded mouse lung tissue with F2545 at 1:100 dilution.