Anti-CaV1.3 Mouse Antibody [G19D14]

目录号:F3798

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生物描述

特异性

Anti-CaV1.3 Mouse Antibody [G19D14] 可检测内源性 CaV1.3 总蛋白水平。

背景 心脏兴奋-收缩偶联是指心肌细胞受到电刺激后触发肌肉收缩的一系列事件。L型Ca²⁺通道在此过程中至关重要,因为它们促进钙离子内流并增强膜兴奋性。目前已鉴定出四种L型Ca²⁺通道亚型:Cav1.1、Cav1.2、Cav1.3和Cav1.4。Cav1.1主要存在于骨骼肌中,而Cav1.4主要在视网膜和某些免疫细胞中表达。Cav1.3存在于心脏、神经元的躯体树突区域、内分泌细胞和感觉细胞中。在心脏中,Cav1.3的活性受多种神经递质的调节。cAMP依赖性蛋白激酶A (PKA)的磷酸化发生在C末端区域内丝氨酸残基1743和1816处。蛋白激酶C (PKC) 也通过N末端结构域丝氨酸81位点的磷酸化,以同工酶特异性的方式调控Cav1.3。此外,C末端的选择性剪接会影响通道行为,显著降低Ca²⁺依赖性的失活。功能上,Cav1.3参与心脏起搏和房室 (AV) 传导。Cav1.3功能障碍与窦房结和房室结异常以及心房颤动的发生有关。

使用信息

抗体应用 IHC, FCM 稀释比例
IHC
1:100
反应性 Human, Mouse
抗体类型 Mouse MW
储存液配方 PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3
储存条件
(自收到货起)
-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years
IHC
实验步骤:
 
脱蜡/补液
1. 脱蜡/水合切片:
2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次,每次 5 分钟。
3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次,每次 10 分钟。
4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次,每次 10 分钟。
5. 用 dH2O 清洗切片两次,每次 5 分钟。
6.抗原修复:对于柠檬酸盐:将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中,在微波炉中加热,直至开始沸腾; 在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。 在工作台上冷却玻片 30 分钟。
 
染色
1. 用 dH2O 清洗切片 3 次,每次 5 分钟。
2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。
3. 用 dH2O 清洗切片两次,每次 5 分钟。
4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。
5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。
6. 除去封闭液,并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。
7. 去除抗体溶液,用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次,每次 5 分钟。
8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。 在加湿室中室温孵育 30 分钟。
9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次,每次 5 分钟。
10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。
11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。
12. 将载玻片浸入 dH2O 中。
13. 如果需要,用苏木精复染切片。
14. 用 dH2O 清洗切片两次,每次 5 分钟。
15. 切片脱水:95%乙醇孵育切片两次,每次 10 秒; 在 100% 乙醇中重复,孵育切片两次,每次 10 秒; 在二甲苯中重复,孵育切片两次,每次 10 秒。
16. 用盖玻片和封固剂封固切片。
 

Application Data

IHC

Validated by Selleck

  • Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human colorectal cancer tissue with F3798 at 1:1000 dilution.

IHC

Validated by Selleck

  • Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human colorectal cancer tissue with F3798 at 1:1000 dilution.