Anti-Collagen IV Mouse Antibody [E5G18]

目录号：F1667

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生物描述

特异性

Anti-Collagen IV Mouse Antibody [E5G18] 可检测内源性 Collagen IV 总蛋白水平。
背景 IV型胶原蛋白是基底膜的主要结构胶原蛋白，基底膜是一种特殊的细胞外基质，提供机械支撑、调节细胞黏附并组织其他基质成分。IV型胶原蛋白是一种异三聚体，由六条α链（α1-α6）组合而成，这些α链由不同的基因编码，在大多数组织中通常排列为两条α1链和一条α2链，在细胞内组装成三螺旋原体。这些原体通过其NC1和7S结构域分泌并交联，形成稳定的片状网络，连接层粘连蛋白、蛋白聚糖和生长因子。IV型胶原蛋白广泛表达于上皮细胞和内皮细胞的基底膜，具有组织特异性的亚型组成，并在发育、组织完整性、细胞迁移以及通过整合素（例如α1β1和α2β1）的信号传导中发挥重要作用。胶原蛋白 IV 的缺陷或异常交联会导致多种病症，包括阿尔波特综合征、古德帕斯彻病、糖尿病肾病和某些皮肤病。

使用信息

抗体应用 IHC 稀释比例
IHC
1:100-1:250
反应性 Human
抗体类型 Mouse MW
储存液配方 PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3
储存条件
(自收到货起)		 -20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years
IHC
实验步骤：
 
脱蜡/补液
1. 脱蜡/水合切片：
2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。
3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。
4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。
5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾； 在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。 在工作台上冷却玻片 30 分钟。
 
染色
1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。
2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。
3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。
5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。
6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。
7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。 在加湿室中室温孵育 30 分钟。
9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。
11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。
12. 将载玻片浸入 dH2O 中。
13. 如果需要，用苏木精复染切片。
14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒； 在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒； 在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。
16. 用盖玻片和封固剂封固切片。
 

Application Data

IHC

Validated by Selleck

  • Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human placenta tissue with F1667 at 1:125 dilution.

IHC

Validated by Selleck

  • Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human placenta tissue with F1667 at 1:125 dilution.