Anti-Collagen VII Mouse Antibody [K3G14]

目录号：F3214

打印

生物描述

特异性

Anti-Collagen VII Mouse Antibody [K3G14] 可检测内源性 Collagen VII 总蛋白水平。
背景 VII型胶原蛋白是一种特殊的纤维状胶原蛋白，主要负责形成锚定纤维，从而稳定皮肤中的真皮-表皮连接。它由COL7A1基因编码，主要在表皮角质形成细胞和真皮成纤维细胞中表达。VII型胶原蛋白的结构为同型三聚体，由三条α1-前体(VII)链组成，每条链都有一个中心三螺旋结构域（约1,530个氨基酸），中间有19个缺陷，包括一个蛋白酶敏感的39个氨基酸的“铰链”区。该中心结构域两侧是两个非胶原结构域：位于N末端的NC-1，包含粘附模块，例如纤连蛋白III型重复序列和一个血管性血友病因子A结构域；以及位于C末端的NC-2，包含一个类似库尼茨蛋白酶抑制剂的片段。两个胶原蛋白VII分子组装成反向平行的二聚体，由二硫键稳定，并进一步聚集成锚定原纤维。功能上，胶原蛋白VII通过与基底膜成分（例如层粘连蛋白-332和胶原蛋白IV）高亲和力结合，将基底膜锚定到真皮层下层，从而维持皮肤完整性；其突变会导致营养不良性大疱性表皮松解症(DEB)，这是一种严重的水疱性皮肤病。

使用信息

抗体应用 IHC-Fr 稀释比例
IHC
1:300 - 1:600
反应性 Human
抗体类型 Mouse MW
储存液配方 PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3
储存条件
(自收到货起)		 -20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years
IHC
实验步骤：
 
脱蜡/补液
1. 脱蜡/水合切片：
2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。
3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。
4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。
5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾； 在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。 在工作台上冷却玻片 30 分钟。
 
染色
1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。
2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。
3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。
5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。
6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。
7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。 在加湿室中室温孵育 30 分钟。
9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。
11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。
12. 将载玻片浸入 dH2O 中。
13. 如果需要，用苏木精复染切片。
14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒； 在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒； 在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。
16. 用盖玻片和封固剂封固切片。
 

Application Data

IHC

Validated by Selleck

  • Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human tonsils tissue with F3214 at 1:500 dilution.

IHC

Validated by Selleck

  • Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human tonsils tissue with F3214 at 1:500 dilution.