Anti-Endothelial Cell Mouse Antibody [K23P8]

目录号：F1713

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生物描述

特异性

Anti-Endothelial Cell Mouse Antibody [K23P8] 可检测内源性 Endothelial Cell 总蛋白水平。
背景 内皮细胞形成单层薄细胞膜，覆盖血管和淋巴管的内表面，是循环液体与周围组织之间的关键屏障。它们通过紧密连接连接并锚定于基底膜，并具有维持血管完整性和介导免疫细胞相互作用的特殊表面蛋白，例如血管内皮细胞钙粘蛋白和血小板粘附分子-1 (PECAM-1)。它们通过释放血管扩张剂（如一氧化氮）和血管收缩剂（如内皮素）来调节血管张力，通过平衡促凝和抗凝因子来维持止血，并控制液体在血管壁上的过滤。它们通过增殖和迁移形成新的毛细血管，在血管生成中发挥重要作用，而这些新的毛细血管对伤口愈合、生殖和肿瘤生长至关重要。内皮细胞还通过表达选择素和整合素来调节免疫监视，促进炎症期间白细胞的滚动、粘附和迁移。内皮细胞功能障碍会导致动脉粥样硬化、高血压、糖尿病相关血管并发症以及慢性炎症等疾病。在肿瘤中，异常内皮细胞会形成不规则、脆弱的血管，缺乏平滑肌和周细胞覆盖，从而促进癌症进展和转移。内皮细胞功能障碍会使其表型从抗凝和抗炎转变为促血栓和促炎，从而推动血管疾病进展。

使用信息

抗体应用 IHC 稀释比例
IHC
1:100
反应性 Rat
抗体类型 Mouse MW
储存液配方 PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3
储存条件
(自收到货起)		 -20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years
IHC
实验步骤：
 
脱蜡/补液
1. 脱蜡/水合切片：
2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。
3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。
4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。
5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾； 在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。 在工作台上冷却玻片 30 分钟。
 
染色
1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。
2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。
3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。
5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。
6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。
7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。 在加湿室中室温孵育 30 分钟。
9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。
11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。
12. 将载玻片浸入 dH2O 中。
13. 如果需要，用苏木精复染切片。
14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒； 在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒； 在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。
16. 用盖玻片和封固剂封固切片。
 

Application Data

IHC

Validated by Selleck

  • Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded rat brain tissue with F1713 at 1:200 dilution.

IHC

Validated by Selleck

  • Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded rat brain tissue with F1713 at 1:200 dilution.