Anti-Melanoma Associated Antigen 100+ / 7 kDa Mouse Antibody [G24P23]

目录号：F3175

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生物描述

特异性

Anti-Melanoma Associated Antigen 100+ / 7 kDa Mouse Antibody [G24P23] 可检测内源性 Melanoma Associated Antigen 100+ / 7 kDa 总蛋白水平。
背景 黑色素瘤相关抗原 100+ / 7 kDa (MAGE) 蛋白是肿瘤相关抗原，通常限于正常成人组织中的睾丸生殖细胞，但在各种癌症中异常表达，包括黑色素瘤、神经胶质瘤、肺癌、膀胱癌和多发性骨髓瘤。“100+/7 kDa”名称是指分子量约为 100 kDa 和 7 kDa 的变体或亚型。从结构上讲，MAGE 蛋白有一个保守的 ~200 个氨基酸 MAGE 同源结构域 (MHD)，该结构域由两个有翼螺旋结构域组成，形成一个用于肽或蛋白质结合的深裂缝，两侧是可变的 N 端和 C 端区域。从功能上讲，MAGE 蛋白可以通过与 RING 型 E3 泛素连接酶相互作用，调节调节细胞凋亡、增殖和代谢的蛋白质降解途径，从而充当致癌驱动因素；例如，MAGE-A3通过刺激TRIM28介导的p53降解来促进肿瘤存活，而MAGE-A4则可能通过不同的蛋白伴侣诱导细胞凋亡。MAGE的肿瘤特异性表达、结构可塑性和致癌作用使它们成为癌症免疫治疗的生物标志物和潜在治疗靶点。

使用信息

抗体应用 IHC, FCM 稀释比例
IHC
1:5 - 1:20
反应性 Human
抗体类型 Mouse MW
储存液配方 PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3
储存条件
(自收到货起)		 -20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years
IHC
实验步骤：
 
脱蜡/补液
1. 脱蜡/水合切片：
2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。
3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。
4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。
5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾； 在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。 在工作台上冷却玻片 30 分钟。
 
染色
1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。
2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。
3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。
5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。
6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。
7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。 在加湿室中室温孵育 30 分钟。
9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。
11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。
12. 将载玻片浸入 dH2O 中。
13. 如果需要，用苏木精复染切片。
14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒； 在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒； 在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。
16. 用盖玻片和封固剂封固切片。
 

Application Data

IHC

Validated by Selleck

  • Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human melanoma tissue with F3175 at 1:20 dilution.

IHC

Validated by Selleck

  • Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human melanoma tissue with F3175 at 1:20 dilution.