Anti-Monocyte + Macrophage Rat Antibody [E17C4]

目录号:F3741

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生物描述

特异性

Anti-Monocyte + Macrophage Rat Antibody [E17C4] 可检测内源性单核细胞和巨噬细胞总抗原。该抗体可识别小鼠巨噬细胞和单核细胞的胞内抗原。它与所有小鼠品系淋巴器官中的巨噬细胞均有强烈反应。

背景 单核细胞和巨噬细胞是先天免疫系统的重要组成部分,在启动和协调炎症反应中发挥着核心作用。除了促进炎症介质的产生和塑造先天性和适应性免疫之外,它们在消解炎症和恢复组织稳态方面也同样至关重要。因此,其功能失调是慢性感染、自身免疫性疾病和严重无菌性炎症疾病发病机制的共同特征。单核细胞占循环白细胞的5-10%,是骨髓来源的单核细胞,寿命较短,仅为1-3天。在稳态条件下,它们支持稳态,并保留分化为组织巨噬细胞的能力。在炎症期间,单核细胞被主动募集到受累部位,在那里分化为炎症巨噬细胞或树突状细胞。巨噬细胞分布于全身所有组织,并表现出显著的功能异质性。它们对于组织发育、免疫监视和维持局部稳态至关重要。许多巨噬细胞群是在胚胎发生过程中建立的,源自卵黄囊或胎儿肝脏祖细胞,并且在正常条件下可以独立于单核细胞补充而存在。相比之下,皮肤、心脏和肠道等组织中的巨噬细胞最初由胚胎祖细胞接种,但在出生后迅速被源自造血干细胞的单核细胞取代。重要的是,组织驻留巨噬细胞既具有增殖能力,又具有自我更新潜力。单核细胞和巨噬细胞的活化和极化都是由它们通过模式识别受体 (PRR) 识别病原体相关或损伤相关的分子模式 (PAMP 和 DAMP) 而触发的,这使得它们能够调整其对各种生理和病理信号的反应。

使用信息

抗体应用 IHC, FCM 稀释比例
反应性 Mouse
抗体类型 Rat MW
储存液配方 PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3
储存条件
(自收到货起)
-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years
IHC
实验步骤:
 
脱蜡/补液
1. 脱蜡/水合切片:
2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次,每次 5 分钟。
3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次,每次 10 分钟。
4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次,每次 10 分钟。
5. 用 dH2O 清洗切片两次,每次 5 分钟。
6.抗原修复:对于柠檬酸盐:将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中,在微波炉中加热,直至开始沸腾; 在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。 在工作台上冷却玻片 30 分钟。
 
染色
1. 用 dH2O 清洗切片 3 次,每次 5 分钟。
2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。
3. 用 dH2O 清洗切片两次,每次 5 分钟。
4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。
5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。
6. 除去封闭液,并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。
7. 去除抗体溶液,用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次,每次 5 分钟。
8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。 在加湿室中室温孵育 30 分钟。
9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次,每次 5 分钟。
10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。
11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。
12. 将载玻片浸入 dH2O 中。
13. 如果需要,用苏木精复染切片。
14. 用 dH2O 清洗切片两次,每次 5 分钟。
15. 切片脱水:95%乙醇孵育切片两次,每次 10 秒; 在 100% 乙醇中重复,孵育切片两次,每次 10 秒; 在二甲苯中重复,孵育切片两次,每次 10 秒。
16. 用盖玻片和封固剂封固切片。
 

Application Data

IHC

Validated by Selleck

  • Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded mouse carotid artery tissue with F3741 at 1:100 dilution.

IHC

Validated by Selleck

  • Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded mouse carotid artery tissue with F3741 at 1:100 dilution.