Anti-Nav1.8/SCN10A Mouse Antibody [F24B8]

目录号：F3462

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生物描述

特异性

Anti-Nav1.8/SCN10A Mouse Antibody [F24B8] 可检测内源性 Nav1.8/SCN10A 总蛋白水平。
背景 Nav1.8/SCN10A由SCN10A基因编码，是一个电压门控钠通道α亚基，属于河豚毒素抗性类，其特征是其孔区发生半胱氨酸取代，从而对纳摩尔浓度的河豚毒素抑制产生抗性。从结构上讲，它是一个大型跨膜蛋白，具有四个同源结构域（I-IV），每个结构域包含六个跨膜片段（S1-S6），构成电压感应区和成孔区。NaV1.8通常与调节门控和运输的β亚基相关。NaV1.8主要在背根神经节（DRG）和颅神经节的小直径和中等直径的痛性感觉神经元中表达，但也存在于心脏的周围神经元件中，尤其是心内神经节，而在心肌细胞中则不存在。功能上，NaV1.8 在相对去极化的电位下激活，缓慢失活，并将钠电流维持在亚阈值电压，从而实现重复动作电位放电和持续兴奋性，尤其是在低温下。在背根神经节 (DRG) 神经元中，它通过放大动作电位阈值附近的兴奋性并与 NaV1.7 相互作用，在疼痛信号传导中发挥关键作用；而在心内神经元中，它调节放电频率和神经递质释放，可能通过神经控制而非直接影响心肌细胞去极化来调节心脏传导。

使用信息

抗体应用 IHC 稀释比例
IHC
1:100
反应性 Mouse, Rat
抗体类型 Mouse MW
储存液配方 PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3
储存条件
(自收到货起)		 -20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years
IHC
实验步骤：
 
脱蜡/补液
1. 脱蜡/水合切片：
2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。
3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。
4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。
5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾； 在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。 在工作台上冷却玻片 30 分钟。
 
染色
1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。
2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。
3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。
5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。
6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。
7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。 在加湿室中室温孵育 30 分钟。
9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。
11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。
12. 将载玻片浸入 dH2O 中。
13. 如果需要，用苏木精复染切片。
14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒； 在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒； 在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。
16. 用盖玻片和封固剂封固切片。
 

Application Data

IHC

Validated by Selleck

  • Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded mouse skin tissue with F3462 at 1:100 dilution.

IHC

Validated by Selleck

  • Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded mouse skin tissue with F3462 at 1:100 dilution.