Anti-NCX1 Mouse Antibody [C23J23]

目录号：F2381

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生物描述

特异性

Anti-NCX1 Mouse Antibody [C23J23] 可检测内源性 NCX1 总蛋白水平。
背景 NCX1（钠钙交换蛋白1）是一种广泛表达的膜蛋白，对细胞内Ca²⁺稳态至关重要，尤其是在心脏和大脑中。NCX1负责将细胞内的Ca²⁺与细胞外的Na⁺交换，从而调节兴奋-收缩偶联和神经元信号传导。NCX1的结构包含九个跨膜片段，其中两个α重复序列区域（参与离子结合和转运）以及一个位于TMS 5–6之间的大型胞内环，该环包含与调节性Ca²⁺结合的β重复序列区域。NCX1存在多种剪接变体，且具有组织特异性的调控表型，其中NCX1.1是主要的心脏亚型。 NCX1的功能受局部因素、离子浓度、脂质以及由PKA和PKC等激酶在包含mAKAP、磷酸酶（PP1、PP2A）和其他调节蛋白的大分子复合物内进行的磷酸化调控。在心肌细胞中，这种组织能够实现精确的β-肾上腺素能调节，但在心力衰竭中会出现过度磷酸化和反应性减弱等改变，这凸显了其在生理和病理状态下的重要性。

使用信息

抗体应用 IHC, FCM 稀释比例
IHC FCM
1:200 1:20 - 1:100
反应性 Human
抗体类型 Mouse MW
储存液配方 PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3
储存条件
(自收到货起)		 -20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years
IHC
实验步骤：
 
脱蜡/补液
1. 脱蜡/水合切片：
2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。
3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。
4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。
5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾； 在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。 在工作台上冷却玻片 30 分钟。
 
染色
1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。
2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。
3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。
5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。
6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。
7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。 在加湿室中室温孵育 30 分钟。
9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。
11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。
12. 将载玻片浸入 dH2O 中。
13. 如果需要，用苏木精复染切片。
14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒； 在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒； 在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。
16. 用盖玻片和封固剂封固切片。
 

Application Data

IHC

Validated by Selleck

  • Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human gastric cancer tissue with F2381 at 1:1000 dilution.

IHC

Validated by Selleck

  • Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human gastric cancer tissue with F2381 at 1:1000 dilution.