Anti-S100A9 + Calprotectin (S100A8/A9 complex) Mouse Antibody [P14P6]

目录号:F1711

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生物描述

特异性

Anti-S100A9 + Calprotectin (S100A8/A9 complex) Mouse Antibody [P14P6] 可检测内源性 S100A9 + Calprotectin (S100A8/A9 complex) 总蛋白水平。

背景 S100A9 + 钙卫蛋白(S100A8/A9复合物)又称髓系相关蛋白MRP8/MRP14,是由S100A8和S100A9组成的Ca²⁺结合异二聚体复合物,两者均属于S100蛋白家族。该复合物主要表达于中性粒细胞、单核细胞和其他免疫细胞中,在炎症和应激条件下会诱导表达。结构上,每个亚基包含两个EF-hand Ca²⁺结合结构域(低亲和力的N端和高亲和力的C端),它们通过铰链区连接,形成稳定的异二聚体或功能性四聚体。功能上,S100A8/A9通过调节白细胞趋化性、吞噬细胞迁移、微管聚合、活性氧产生和细胞因子释放,在先天免疫和炎症中发挥多种作用。它还能与TLR4和RAGE等受体结合,激活下游信号通路,例如MAPK、PI3K/Akt、NF-κB和mTOR。在癌症中,S100A8/A9调节肿瘤的生长、转移、凋亡、耐药性和预后,使其成为一种极具潜力的生物标志物和治疗靶点。

使用信息

抗体应用 IHC 稀释比例
IHC
1:1000
反应性 Human
抗体类型 Mouse MW
储存液配方 PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3
储存条件
(自收到货起)
-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years
IHC
实验步骤:
 
脱蜡/补液
1. 脱蜡/水合切片:
2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次,每次 5 分钟。
3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次,每次 10 分钟。
4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次,每次 10 分钟。
5. 用 dH2O 清洗切片两次,每次 5 分钟。
6.抗原修复:对于柠檬酸盐:将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中,在微波炉中加热,直至开始沸腾; 在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。 在工作台上冷却玻片 30 分钟。
 
染色
1. 用 dH2O 清洗切片 3 次,每次 5 分钟。
2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。
3. 用 dH2O 清洗切片两次,每次 5 分钟。
4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。
5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。
6. 除去封闭液,并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。
7. 去除抗体溶液,用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次,每次 5 分钟。
8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。 在加湿室中室温孵育 30 分钟。
9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次,每次 5 分钟。
10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。
11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。
12. 将载玻片浸入 dH2O 中。
13. 如果需要,用苏木精复染切片。
14. 用 dH2O 清洗切片两次,每次 5 分钟。
15. 切片脱水:95%乙醇孵育切片两次,每次 10 秒; 在 100% 乙醇中重复,孵育切片两次,每次 10 秒; 在二甲苯中重复,孵育切片两次,每次 10 秒。
16. 用盖玻片和封固剂封固切片。
 

Application Data

IHC

Validated by Selleck

  • Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human tonsils tissue with F1711 at 1:1000 dilution.

IHC

Validated by Selleck

  • Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human tonsils tissue with F1711 at 1:1000 dilution.