APE Antibody [F3K5] Datasheet

生物描述

特异性	APE Antibody [F3K5] 可检测内源性 APE 总蛋白水平。
背景	无嘌呤/无嘧啶核酸内切酶1（APE1，也称为APEX1或Ref-1）是哺乳动物细胞中主要的无碱基位点核酸内切酶，也是一种多功能核蛋白，它整合了碱基切除修复、转录因子的氧化还原调控以及更广泛的DNA损伤反应信号通路。该蛋白属于二价金属依赖性α/β磷酸酯酶超家族，其结构包含一个C端催化核心，该核心具有活性位点残基和柔性环，介导DNA结合、损伤识别和切口化学反应；此外，其独特的N端片段提供核靶向和与伴侣蛋白相互作用的界面，并调节定位和调控功能。 APE1 识别碱基切除修复或自发性碱基丢失过程中产生的无碱基位点，将损伤翻转至紧凑的活性位点口袋中，并切割无碱基核苷酸 5′ 端的磷酸二酯骨架，形成具有 3′-羟基和 5′-脱氧核糖磷酸末端的切口，这些末端适于后续由 DNA 聚合酶 β 进行缺口填充和连接，从而防止有毒 AP 位点和单链断裂的积累。该酶还通过 3′-修复二酯酶和 3′-核酸外切酶活性去除多种 3′-封闭基团，例如 3′-磷酸酯和 3′-磷酸乙醇酸酯，直接参与氧化和辐射损伤引起的 DNA 末端的修复，并促进多种修复途径的完成。 APE1 的额外核苷酸切口修复活性使其无需糖基化酶的预先作用即可直接切割某些氧化损伤的碱基，从而将其功能扩展到经典碱基切除修复 (BER) 之外，并将其与氧化嘌呤和嘧啶的替代修复途径联系起来。APE1 的 N 端区域具有氧化还原调节功能，它能将 AP-1、NF-κB、HIF-1α 等转录因子的关键半胱氨酸残基维持在还原态，从而促进 DNA 结合，进而将细胞氧化还原状态和 DNA 损伤与调控炎症、血管生成和应激适应的转录反应联系起来。APE1 与众多 DNA 修复和染色质相关蛋白相互作用，在 BER 相互作用组中形成一个中心枢纽，协调损伤识别、修复合成和染色质访问，并且还与 ATM/ATR 介导的检查点通路相互作用，使 APE1 成为基因毒性应激后基因组稳定性和细胞命运的调节因子。 APE1 表达、亚细胞分布和翻译后修饰的严格调控对于细胞活力至关重要；APE1 的缺失会导致小鼠胚胎死亡，并损害其对氧化和烷基化损伤的抵抗力；而异常的过表达、错误定位或活性改变则见于多种癌症和神经病理学，并与治疗耐药性和疾病易感性相关。

特异性

APE Antibody [F3K5] 可检测内源性 APE 总蛋白水平。

背景

无嘌呤/无嘧啶核酸内切酶1（APE1，也称为APEX1或Ref-1）是哺乳动物细胞中主要的无碱基位点核酸内切酶，也是一种多功能核蛋白，它整合了碱基切除修复、转录因子的氧化还原调控以及更广泛的DNA损伤反应信号通路。该蛋白属于二价金属依赖性α/β磷酸酯酶超家族，其结构包含一个C端催化核心，该核心具有活性位点残基和柔性环，介导DNA结合、损伤识别和切口化学反应；此外，其独特的N端片段提供核靶向和与伴侣蛋白相互作用的界面，并调节定位和调控功能。 APE1 识别碱基切除修复或自发性碱基丢失过程中产生的无碱基位点，将损伤翻转至紧凑的活性位点口袋中，并切割无碱基核苷酸 5′ 端的磷酸二酯骨架，形成具有 3′-羟基和 5′-脱氧核糖磷酸末端的切口，这些末端适于后续由 DNA 聚合酶 β 进行缺口填充和连接，从而防止有毒 AP 位点和单链断裂的积累。该酶还通过 3′-修复二酯酶和 3′-核酸外切酶活性去除多种 3′-封闭基团，例如 3′-磷酸酯和 3′-磷酸乙醇酸酯，直接参与氧化和辐射损伤引起的 DNA 末端的修复，并促进多种修复途径的完成。 APE1 的额外核苷酸切口修复活性使其无需糖基化酶的预先作用即可直接切割某些氧化损伤的碱基，从而将其功能扩展到经典碱基切除修复 (BER) 之外，并将其与氧化嘌呤和嘧啶的替代修复途径联系起来。APE1 的 N 端区域具有氧化还原调节功能，它能将 AP-1、NF-κB、HIF-1α 等转录因子的关键半胱氨酸残基维持在还原态，从而促进 DNA 结合，进而将细胞氧化还原状态和 DNA 损伤与调控炎症、血管生成和应激适应的转录反应联系起来。APE1 与众多 DNA 修复和染色质相关蛋白相互作用，在 BER 相互作用组中形成一个中心枢纽，协调损伤识别、修复合成和染色质访问，并且还与 ATM/ATR 介导的检查点通路相互作用，使 APE1 成为基因毒性应激后基因组稳定性和细胞命运的调节因子。 APE1 表达、亚细胞分布和翻译后修饰的严格调控对于细胞活力至关重要；APE1 的缺失会导致小鼠胚胎死亡，并损害其对氧化和烷基化损伤的抵抗力；而异常的过表达、错误定位或活性改变则见于多种癌症和神经病理学，并与治疗耐药性和疾病易感性相关。

使用信息

抗体应用

WB, IHC, IF, FCM, ChIP

稀释比例

WB	IHC	IF	FCM	CHIP
1:1000	1:2000	1:250	1:500	1:200

反应性

Mouse, Rat, Human

抗体类型

Rabbit Monoclonal Antibody

MW

35 kDa

储存液配方

PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3

储存条件
(自收到货起)

-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

实验方法

文献参考

Application Data

WB

Validated by Selleck

Lane 1: HeLa, Lane 2: HeLa (KO APEX1), Lane 3: HCT116, Lane 4: NIH/3T3