CD8α Rabbit mAb

目录号：F3035

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生物描述

特异性

CD8α Rabbit mAb 可检测内源性 CD8α 总的蛋白水平。猴种属样品仅适于免疫组织化学（石蜡）。
背景

CD8α 是一种细胞表面糖蛋白，在造血细胞上以 CD8αβ 异二聚体或 CD8αα 同二聚体的形式表达，具有不同的作用。从结构上讲，其细胞外结构域包含两个用于 MHC I 类结合的免疫球蛋白样结构域，而其细胞质结构域与 Src 家族激酶（如 Lck）相互作用，这对 TCR 信号传导至关重要。CD8α 增强细胞毒性 T 淋巴细胞 (CD8αβ) 的抗原敏感性，但在其同二聚体形式 (CD8αα) 中，它充当辅助抑制因子，降低 T 细胞敏感性。CD8α 主要在细胞毒性 T 细胞、肠道上皮内淋巴细胞和一些 NK 细胞上表达，在免疫调控和 T 细胞活化中起关键作用。

使用信息

抗体应用 WB, IP, IHC, FCM 稀释比例
WB IP IHC FCM
1:1000 1:100 1:100 - 1:400 1:50 - 1:200
反应性 Human , Monkey
抗体类型 Rabbit MW 29 kDa
储存液配方 PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3
储存条件
(自收到货起)		 -20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years
IHC
实验步骤：
 
脱蜡/补液
1. 脱蜡/水合切片：
2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。
3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。
4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。
5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾； 在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。 在工作台上冷却玻片 30 分钟。
 
染色
1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。
2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。
3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。
5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。
6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。
7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。 在加湿室中室温孵育 30 分钟。
9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。
11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。
12. 将载玻片浸入 dH2O 中。
13. 如果需要，用苏木精复染切片。
14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒； 在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒； 在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。
16. 用盖玻片和封固剂封固切片。
 

Application Data

WB

Validated by Selleck

  • Lane 1: MLOT-4