Fibrillarin Rabbit mAb Datasheet

生物描述

特异性	Fibrillarin Rabbit mAb 可检测内源性 Fibrillarin 总的蛋白水平。
背景	纤维蛋白是一种高度保守的核仁蛋白，对于小核仁核糖核蛋白 (snoRNP) 的形成至关重要。它在前 rRNA 甲基化、加工和核糖体组装中起关键作用。人类纤维蛋白 (321 个氨基酸) 由三个主要结构域组成：N 端富含甘氨酸和精氨酸 (GAR) 的结构域、中心 RNA 结合结构域和 C 端 α-螺旋结构域，形成其甲基转移酶区域。 Fibrillarin 是一种 S-腺苷-L-蛋氨酸依赖性甲基转移酶，可甲基化 rRNA 中的核糖部分，也可作为蛋白质甲基转移酶，修饰组蛋白 H2A。

特异性

Fibrillarin Rabbit mAb 可检测内源性 Fibrillarin 总的蛋白水平。

背景

纤维蛋白是一种高度保守的核仁蛋白，对于小核仁核糖核蛋白 (snoRNP) 的形成至关重要。它在前 rRNA 甲基化、加工和核糖体组装中起关键作用。人类纤维蛋白 (321 个氨基酸) 由三个主要结构域组成：N 端富含甘氨酸和精氨酸 (GAR) 的结构域、中心 RNA 结合结构域和 C 端 α-螺旋结构域，形成其甲基转移酶区域。 Fibrillarin 是一种 S-腺苷-L-蛋氨酸依赖性甲基转移酶，可甲基化 rRNA 中的核糖部分，也可作为蛋白质甲基转移酶，修饰组蛋白 H2A。

使用信息

抗体应用

WB, IF

稀释比例

WB	IF
1:1000	1:50

反应性

Human , Mouse, Rat , Monkey

抗体类型

Rabbit

MW

37 kDa

储存液配方

PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3

储存条件
(自收到货起)

-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

实验方法
IF	实验步骤：标本制备 1. 吸出液体，然后用 1X PBS 稀释的 4% 多聚甲醛覆盖细胞至 2-3 mm 的深度。注意：多聚甲醛有毒，只能在通风橱中使用。 2. 室温固定细胞 15 分钟。 3. 吸出固定液，用 1X PBS 冲洗 3 次，每次 5 分钟。 4. 继续进行免疫染色。免疫染色 1. 添加封闭缓冲液并在室温下孵育 60 分钟。 2. 按照建议在抗体稀释缓冲液中制备一抗稀释液。 3. 吸出封闭液，加入制备好的一抗稀释液。 4. 4°C 孵育过夜。 5. 在 1X PBS 中冲洗 3 次，每次 5 分钟。 6. 将样本放入用抗体稀释缓冲液稀释的荧光染料偶联二抗中，室温避光孵育 1-2 小时。 7. 在 1X PBS 中冲洗 3 次，每次 5 分钟。 8. 使用带有 DAPI 的封固剂封固载玻片并盖上盖玻片。 9. 为获得最佳效果，请让封固剂在室温下固化过夜。如需长期保存，请将载玻片平放在 4°C 避光保存。

实验方法

IF

实验步骤：

标本制备

1. 吸出液体，然后用 1X PBS 稀释的 4% 多聚甲醛覆盖细胞至 2-3 mm 的深度。

注意：多聚甲醛有毒，只能在通风橱中使用。

2. 室温固定细胞 15 分钟。

3. 吸出固定液，用 1X PBS 冲洗 3 次，每次 5 分钟。

4. 继续进行免疫染色。

免疫染色

1. 添加封闭缓冲液并在室温下孵育 60 分钟。

2. 按照建议在抗体稀释缓冲液中制备一抗稀释液。

3. 吸出封闭液，加入制备好的一抗稀释液。

4. 4°C 孵育过夜。

5. 在 1X PBS 中冲洗 3 次，每次 5 分钟。

6. 将样本放入用抗体稀释缓冲液稀释的荧光染料偶联二抗中，室温避光孵育 1-2 小时。

7. 在 1X PBS 中冲洗 3 次，每次 5 分钟。

8. 使用带有 DAPI 的封固剂封固载玻片并盖上盖玻片。

9. 为获得最佳效果，请让封固剂在室温下固化过夜。如需长期保存，请将载玻片平放在 4°C 避光保存。

文献参考

[1] Shubina MY, et al. Biochemistry (Mosc). 2016 Sep;81(9):941-50.

Application Data

WB

Validated by Selleck

Lane 1: HEK293
Lane 2: PC12
Lane 3: COS
Lane 4: Neuro-2a