hnRNP Q/R Rabbit mAb

目录号：F1365

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生物描述

特异性

hnRNP Q/R Rabbit mAb识别内源性hnRNP Q和hnRNP R总蛋白。
背景

异质核糖核糖蛋白 Q (hnRNP Q) 在 mRNA 代谢中发挥各种作用，包括剪接调控、编辑、稳定性、运输和翻译。hnRNP Q 参与细胞质 mRNA 运输与其与突触结合蛋白的相互作用以及其与驱动蛋白运动蛋白 KIF5 在 RNA 颗粒中的存在有关。 hnRNP R 与 hnRNP Q 相关，与存活运动神经元 (SMN) 蛋白共同将 β-肌动蛋白 mRNA 转运至轴突和生长锥，其消耗会损害轴突生长。鉴于 hnRNP Q 与 SMN 的相互作用，它可能还参与了神经元中的 mRNA 运输和局部翻译。hnRNP Q1 结合 Cdc42/N-WASP/Arp2/3 复合物的 mRNA 并与 Cdc42 mRNA 共定位，可能调节肌动蛋白动力学和神经元形态发生。

使用信息

抗体应用 WB, IP 稀释比例
WB IP
1:1000 1:50
反应性 Human, Mouse, Rat, Monkey
抗体类型 Rabbit MW 65-82 kDa
储存液配方 PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3
储存条件
(自收到货起)		 –20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years
WB

Western Blotting

 
样品制备
1. 吸去培养基,用1X PBS清洗细胞。
2. 加入1X SDS上样缓冲液裂解细胞,将提取物转移至微量离心管中。置于冰上。
3. 超声10–15秒,完成细胞裂解和DNA剪切。
4. 将20 µl样品在95–100°C加热5分钟,然后置于冰上冷却。
5. 离心5分钟(使用微量离心机)。
6. 将适量样品上样至SDS-PAGE凝胶(上样量取决于提取蛋白浓度)。注意:同时请上样预染分子量标准,以确定分子量并验证电转效果。
7. 电转至硝酸纤维素膜/PVDF膜(湿转法参考条件: 150mA 120min)。
 
膜封闭与抗体孵育
a. 封闭
1. (可选)转膜完成后,用TBS室温洗膜5分钟。
2. 将膜在封闭液中室温孵育1小时。
3. 用TBST洗涤3次,每次5分钟。
 
b. 抗体孵育
1. 将膜与一抗(按推荐的稀释度和稀释液配制)置于一抗稀释缓冲液中,4°C温和摇床过夜孵育。
2. 用TBST洗涤3次,每次5分钟。
3. 将膜与适当的二抗(稀释于封闭液中)在室温下温和摇床孵育1小时。
4. 用TBST洗涤3次,每次5分钟。
5. 进行检测。
 
显影检测
1. 抗体孵育结束后,用TBST洗膜3次,每次5分钟。
2. 配制ECL发光试剂(或根据二抗类型选择其他显色剂/底物)。混匀。
3. 将底物与膜孵育1分钟,去除多余溶液(膜保持湿润),置于显影仪中进行曝光。

Application Data

WB

Validated by Selleck

  • Lane 1: SW620
    Lane 2: HCT116