TGM2 Rabbit mAb

目录号：F3071

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生物描述

特异性

TGM2 Rabbit mAb 可检测内源性 TGM2 总的蛋白水平。
背景

组织转谷氨酰胺酶 2 (TGM2)，也称为 tTG 或 TG2，是一种钙依赖性酶，属于转谷氨酰胺酶家族 (EC 2.3.2.13)。它通过形成 ε-(γ-谷氨酰)赖氨酸键来催化蛋白质交联，从而增强蛋白质稳定性。TGM2 具有两种异构体 (77 kDa 和 61.7 kDa)，由可变剪接产生。从结构上讲，它由 N 端 β-夹层结构域 (纤连蛋白结合)、转酰胺基核心结构域 (GTP 结合、催化三联体) 和两个 C 端 β-桶 (调控活性) 组成。它在细胞质、细胞核和质膜中普遍表达，并通过纤连蛋白相互作用参与 ECM 稳定和细胞黏附。 TGM2 可能在潜在 TGF-β 的储存和激活中发挥重要作用，并参与调控细胞内通路，如自噬/线粒体自噬、外泌体形成和分子伴侣功能，这些通路是细胞应激条件下蛋白质稳态调控的基础。

使用信息

抗体应用 WB, IHC 稀释比例
WB IHC
1:1000 1:100
反应性 Human , Mouse, Rat , Monkey
抗体类型 Rabbit MW 78 kDa
储存液配方 PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3
储存条件
(自收到货起)		 -20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years
IHC
实验步骤：
 
脱蜡/补液
1. 脱蜡/水合切片：
2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。
3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。
4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。
5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾； 在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。 在工作台上冷却玻片 30 分钟。
 
染色
1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。
2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。
3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。
5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。
6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。
7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。 在加湿室中室温孵育 30 分钟。
9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。
11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。
12. 将载玻片浸入 dH2O 中。
13. 如果需要，用苏木精复染切片。
14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒； 在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒； 在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。
16. 用盖玻片和封固剂封固切片。
 

Application Data

WB

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  • Lane 1: HeLa
    Lane 2: COS
    Lane 3: K562