TIMP2 mAb

目录号：F1218

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生物描述

特异性

TIMP2 mAb 可检测内源性总 TIMP2 的蛋白水平。
背景

金属蛋白酶组织抑制因子 2 (Tissue Inhibitor of Metalloproteinases 2, TIMP2) 是 TIMP 家族的成员，通过抑制基质金属蛋白酶 (MMP) 来调控细胞外基质 (ECM) 周转。TIMP2 基因位于染色体 17q25.3 上，编码 194 个氨基酸的蛋白质，分子量约为 21 kDa。它在大多数细胞类型中广泛表达，是正常组织中最常见的 TIMP。TIMP2 在控制细胞周围蛋白水解方面起着至关重要的作用，影响细胞生长、增殖、迁移、炎症、抑制细胞侵袭、肿瘤发生、转移、血管生成和细胞衰老等过程。 TIMP2 与各种 MMP（例如 MMP1、MMP2、MMP9）形成高亲和力复合物，特别是与细胞表面的 MMP14 (MT1-MMP) 结合，后者可作为适配器激活 pro-MMP2，从而导致随后的 MMP2 和 MMP9 激活。此外，TIMP2 与 α3β1 整合素相互作用，通过 SHP-1 激活和 p27 的核定位促进细胞周期停滞。

使用信息

抗体应用 IHC 稀释比例
IHC
1:800
反应性 Human
抗体类型 Mouse MW 24 kDa
储存液配方 PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN₃
储存条件
(自收到货起)		 –20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years
IHC

实验步骤：

 
脱蜡/补液
1. 脱蜡/水合切片：
2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。
3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。
4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。
5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾； 在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。 在工作台上冷却玻片 30 分钟。
 
染色
1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。
2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。
3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。
5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。
6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。
7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。 在加湿室中室温孵育 30 分钟。
9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。
11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。
12. 将载玻片浸入 dH2O 中。
13. 如果需要，用苏木精复染切片。
14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒； 在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒； 在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。
16. 用盖玻片和封固剂封固切片。

Application Data

IHC

Validated by Selleck

  • Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded Human placenta tissue with F1218 at 1/2400 dilution.