Anti-C3 Rabbit mAb
目录号: F1700
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Lane 1: Mouse kidney
Lane 2: Mouse spleen
Lane 3: Mouse heart
操作要点
WB
蛋白定位
细胞外环境
建议使用 RIPA/NP-40 裂解。
使用信息
| 稀释比例 |
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|
| 抗体应用 |
|---|
| WB, IHC |
| 抗体类型 |
|---|
| Rabbit |
| 反应性 |
|---|
| Human, Mouse, Rat |
| 储存液配方 |
|---|
| PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3 |
| 储存条件(自收到货起) |
|---|
| –20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years |
| 预测分子量 |
|---|
| 187 kDa |
| 阳性对照 | Human fetal liver, fetal heart and fetal kidney; Human serum, plasma and milk; Mouse plasma; Mouse brain, kidney, spleen and heart; Mouse liver, cerebral cortex and cardiac muscle; Rat brain, spleen, heart and kidney; Rat plasma; Rat kidney, liver and lung; HepG2 (PMID: 23104558) |
|---|---|
| 阴性对照 |
实验方法
| WB |
|---|
Western Blotting 样品制备
1. 吸去培养基,用1X PBS清洗细胞。
2. 加入1X SDS上样缓冲液裂解细胞,将提取物转移至微量离心管中。置于冰上。
3. 超声10–15秒,完成细胞裂解和DNA剪切。
4. 将20 µl样品在95–100°C加热5分钟,然后置于冰上冷却。
5. 离心5分钟(使用微量离心机)。
6. 将适量样品上样至SDS-PAGE凝胶(上样量取决于提取蛋白浓度)。注意:同时请上样预染分子量标准,以确定分子量并验证电转效果。
7. 电转至硝酸纤维素膜/PVDF膜。
膜封闭与抗体孵育
a. 封闭
1. (可选)转膜完成后,用TBS室温洗膜5分钟。
2. 将膜在封闭液中室温孵育1小时。
3. 用TBST洗涤3次,每次5分钟。
b. 抗体孵育
1. 将膜与一抗(按推荐的稀释度和稀释液配制)置于一抗稀释缓冲液中,4°C温和摇床过夜孵育。
2. 用TBST洗涤3次,每次5分钟。
3. 将膜与适当的二抗(稀释于封闭液中)在室温下温和摇床孵育1小时。
4. 用TBST洗涤3次,每次5分钟。
5. 进行检测。
显影检测
1. 抗体孵育结束后,用TBST洗膜3次,每次5分钟。
2. 配制ECL发光试剂(或根据二抗类型选择其他显色剂/底物)。混匀。
3. 将底物与膜孵育1分钟,去除多余溶液(膜保持湿润),置于显影仪中进行曝光。
|
生物描述
| 特异性 |
|---|
C3 Rabbit mAb 可检测内源性总 C3 的蛋白水平。 |
| 别名 |
|---|
| C3,C3b,Complement C3 |
| Uniprot ID |
|---|
| P01024 |
| 克隆号 |
|---|
| C23P8 |
| 背景 |
|---|
C3 是补体系统的核心成分，主要由肝脏产生，在血液、组织和细胞内浓度较高。它通过增强细菌清除、调控病毒感染期间的 CD4+ 和 CD8+ T 细胞反应以及促进 B 细胞反应，在免疫中发挥关键作用。C3 参与组织修复、肝脏再生、骨骼发育、造血干细胞归巢和两栖动物的肢体再生。它介导血小板活化，对止血至关重要，缺乏 C3 会导致出血增加和血栓不稳定性。然而，C3 在脑缺血、脊髓损伤和出血等情况下也有不利影响。 |
| 参考文献 |
|---|
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