Protein A/G免疫沉淀磁珠
仅限科研使用
Selleck Protein A/G免疫沉淀磁珠使用“纳米表面生物技术(S-TEC)，Protein A/G包被在超顺磁性磁珠微球表面，包被密度高达9.3×1013个分子/平方厘米。与同类产品相比，Selleck Protein A/G免疫沉淀磁珠表面具有更多的抗体结合位点。该磁珠可用于蛋白质免疫共沉淀。
产品优势
省时：比亲和凝胶法节省大约80min（以IP实验为例比较）；
操作简单：磁性分离，无需离心；
非特异低：亲和凝胶孔径大，容易产生非特异吸附，而磁珠孔径小，不容易产生非特异吸附；
结合量高：磁珠表面PorteinA/G的蛋白包被量高达9.3×1013个分子/平方厘米， 抗体加载量为0.4-0.5 mg/mL磁珠悬液。
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价格对比
产品描述
Protein A/G免疫沉淀磁珠使用“纳米表面生物技术”(S-TEC)，Protein A/G包被在超顺磁性磁珠微球表面， 包被密度高达9.3×1013个分子/平方厘米。与同类产品相比，Selleck Protein A/G免疫沉淀磁珠表面具有更多的抗体结合位点。在Co-IP实验中，只需使用更少的磁珠量，非特异性结合低，使用简便有效。Selleck Protein A/G免疫沉淀磁珠具有大面积特异的表面区域，从而大大缩短抗体吸附和抗原结合的时间。最短时，抗原和抗体的结合时间只需10分钟，可以在30分钟内完成完整的Co-IP实验。Selleck Protein A/G免疫沉淀磁珠适用的范围广泛，例如细胞裂解液、细胞分泌液上清、血清、动物腹水以及其它的免疫抗原等。
特性
Protein A/G磁珠是将Protein A重组蛋白和Protein G重组蛋白分别偶联到磁珠表面制备而成的亲和纯化磁珠。其中，Protein A含有四个IgG的Fc结合区域，而Protein G含有两个IgG的Fc结合区域。Protein A/G磁珠结合了Protein A和Protein G的优点，能够高效捕获和纯化a广泛种属和亚类的IgG抗体。与单独使用Protein A或Protein G相比，Protein A/G磁珠的IgG结合能力更强，且结合过程受pH值影响更小。
产品性质
| 浓度 | 10 mg/mL |
|---|---|
| 磁珠大小 | 100 nm |
| 人IgG结合能力 | 0.4-0.5 mg/mL |
| 配体 | 重组蛋白A/G |
| 应用 | Protein纯化，免疫沉淀 |
| pH稳定性 | 6-8 （长期） |
| 运输条件 | 4°C冰袋 |
储存条件(自收到货起)
4°C可以储存2年。在缺乏甘油的情况下避免反复冻融。
实验方法
图1展示了免疫共沉淀（Co-IP）的操作方法。可以根据抗体类型和靶蛋白进行进一步的优化。Protein A/G免疫磁珠是进行Co-IP实验的最佳方案。
表1 免疫共沉淀（IP）的操作方法
推荐的缓冲液配方
| 缓冲液 | 推荐配方（自备） |
|---|---|
| Binding buffer | 50 mM Tris, 150 mM NaCl, 0.1%-0.5% detergent (TritonX-100, Tween 20 or NP40), pH 7.5 |
| Wash buffer | 50 mM Tris, 150 mM NaCl, 0.1%-0.5% detergent, pH 7.5 |
| Elution buffer | 0.1 M -0.2 M Glycine, 0.1%-0.5% detergent, pH 2.5-3.1 (or 0.1 M citric acid, 0.1%-0.5% detergent, pH 2.5-3.1) |
| Neutralize buffer | 1M Tris, pH8.0 |
实验之前的注意事项
1 进行Co-IP实验之前，请仔细阅读操作说明；
2 该产品需要使用磁力架
3 使用之前，请将Protein A/G免疫磁珠混匀；
4 Protein A/G免疫磁珠应该保持在储存液中避免干掉；
5 Protein A/G免疫磁珠应避免冻融或离心；
6 为保证最佳结果，请选择特异性好的抗体；
7 根据不同的抗体和抗原仅进行实验方法的优化；
| Species | Antibody class | sProtein A/G | sProtein A |
|---|---|---|---|
| Human | Total IgG | ＋＋＋＋＋ | ＋＋＋＋＋ |
| IgG1, IgG2 | ＋＋＋＋＋ | ＋＋＋＋＋ | |
| IgG3 | ＋＋＋＋＋ | ＋ | |
| IgG4 | ＋＋＋＋＋ | ＋＋＋＋＋ | |
| IgM | ＋ | ＋ | |
| IgD | － | － | |
| IgA | ＋ | ＋ | |
| IgA1, IgA2 | ＋ | ＋ | |
| IgE | ＋＋＋ | ＋＋＋ | |
| Fab | ＋ | ＋ | |
| ScFv | ＋ | ＋ | |
| Mouse | Total IgG | ＋＋＋＋＋ | ＋＋＋＋＋ |
| IgM | － | － | |
| IgG1 | ＋＋＋ | ＋ | |
| IgG2a | ＋＋＋ | ＋＋＋ | |
| IgG2b | ＋＋＋ | ＋＋＋ | |
| IgG3 | ＋＋＋ | ＋＋＋＋＋ | |
| Rat | Total IgG | ＋＋＋ | ＋ |
| IgG 1 | ＋＋＋ | ＋＋＋ | |
| IgG2a | ＋＋＋＋＋ | ＋＋＋ | |
| IgG2b | ＋ | ＋＋＋ | |
| IgG2c | ＋＋＋＋＋ | ＋＋＋ | |
| Cow | Total IgG | ＋＋＋＋＋ | ＋ |
| IgG1 | ＋＋＋＋＋ | ＋ | |
| IgG2 | ＋＋＋＋＋ | ＋＋＋＋＋ | |
| Goat | Total IgG | ＋＋＋＋＋ | ＋ |
| IgG1 | ＋＋＋＋＋ | ＋ | |
| IgG2 | ＋＋＋＋＋ | ＋＋＋＋＋ | |
| Sheep | Total IgG | ＋＋＋＋＋ | ＋ |
| IgG1 | ＋＋＋＋＋ | ＋ | |
| IgG2 | ＋＋＋＋＋ | ＋＋＋＋＋ | |
| Horse | Total IgG | ＋＋＋＋＋ | ＋ |
| IgG(ab), IgG(c) | ＋ | － | |
| IgG(T) | ＋＋＋＋＋ | ＋ | |
| Rabbit | Total IgG | ＋＋＋＋＋ | ＋＋＋＋＋ |
| Guinea pig | Total IgG | ＋＋＋＋＋ | ＋＋＋＋＋ |
| Hamster | Total IgG | ＋＋＋ | ＋＋＋ |
| Pig | Total IgG | ＋＋＋＋＋ | ＋＋＋＋＋ |
| Donkey | Total IgG | ＋＋＋＋＋ | ＋＋＋ |
| Cat | Total IgG | ＋＋＋＋＋ | ＋＋＋＋＋ |
| Dog | Total IgG | ＋＋＋＋＋ | ＋＋＋＋＋ |
| Monkey | Total IgG | ＋＋＋＋＋ | ＋＋＋＋＋ |
| Chicken | Total IgG | － | － |
Notes: "+"= weak binding, "+++"=medium binding, "+++++"=strong binding, "-"=no binding
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