CD163 Rabbit mAb
目录号: F1548
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Lane 1: Mouse liver
Lane 2: Mouse heart
Lane 3: Mouse spleen
Lane 4: Mouse thymus
Lane 5: Rat liver
Lane 6: Rat heart
Lane 7: Rat spleen
Lane 8: U937
Lane 9: THP-1
Lane 10: J774A.1
操作要点
WB
蛋白定位
细胞外环境; 细胞膜
建议使用 RIPA/NP-40 裂解。
使用信息
| 稀释比例 |
|---|
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| 抗体应用 |
|---|
| WB, IHC, FCM |
| 抗体类型 |
|---|
| Rabbit |
| 反应性 |
|---|
| Human, Mouse, Rat |
| 储存液配方 |
|---|
| PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3 |
| 储存条件(自收到货起) |
|---|
| –20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years |
| 预测分子量 |
|---|
| 150 kDa |
| 阳性对照 | Human liver; Human fetal liver; Human lung cancer; Human tonsil; Rat liver; Rat muscle; Mouse spleen; Human fetal spleen; Mouse spleen; Human breast carcinomal; Human placenta; Human placenta; Mouse liver; Mouse heart; Rat achilles; Human liver; Human placenta; Rat heart; Rat spleenMouse thymus; PBMC |
|---|---|
| 阴性对照 | U937; THP-1; J774A.1 (PMID: 16368951,10648003 , 10577520) |
实验方法
| WB |
|---|
Western Blotting 样品制备
1. 吸去培养基,用1X PBS清洗细胞。
2. 加入1X SDS上样缓冲液裂解细胞,将提取物转移至微量离心管中。置于冰上。
3. 超声10–15秒,完成细胞裂解和DNA剪切。
4. 将20 µl样品在95–100°C加热5分钟,然后置于冰上冷却。
5. 离心5分钟(使用微量离心机)。
6. 将适量样品上样至SDS-PAGE凝胶(上样量取决于提取蛋白浓度)。注意:同时请上样预染分子量标准,以确定分子量并验证电转效果。
7. 电转至硝酸纤维素膜/PVDF膜。
膜封闭与抗体孵育
a. 封闭
1. (可选)转膜完成后,用TBS室温洗膜5分钟。
2. 将膜在封闭液中室温孵育1小时。
3. 用TBST洗涤3次,每次5分钟。
b. 抗体孵育
1. 将膜与一抗(按推荐的稀释度和稀释液配制)置于一抗稀释缓冲液中,4°C温和摇床过夜孵育。
2. 用TBST洗涤3次,每次5分钟。
3. 将膜与适当的二抗(稀释于封闭液中)在室温下温和摇床孵育1小时。
4. 用TBST洗涤3次,每次5分钟。
5. 进行检测。
显影检测
1. 抗体孵育结束后,用TBST洗膜3次,每次5分钟。
2. 配制ECL发光试剂(或根据二抗类型选择其他显色剂/底物)。混匀。
3. 将底物与膜孵育1分钟,去除多余溶液(膜保持湿润),置于显影仪中进行曝光。
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生物描述
| 特异性 |
|---|
CD163 Rabbit mAb识别内源性CD163总蛋白水平。 |
| Uniprot ID |
|---|
| Q86VB7 |
| 克隆号 |
|---|
| P12L8 |
| 背景 |
|---|
CD163 是一种跨膜清道夫受体，存在于巨噬细胞表面。它具有九个 B 型清道夫受体富含半胱氨酸 (SRCR) 胞外结构域，可促进血清结合珠蛋白的清除和内吞、病原体结合、信号转导和钙结合。CD163 可作为 M2 型巨噬细胞的标记物，包括 M2 型肿瘤相关巨噬细胞 (TAM)，它们通过分泌促进血管生成、免疫抑制和转移的细胞因子来促进癌症的进展。炎症刺激和应激信号可诱导CD163细胞外结构域的脱落，导致可溶性CD163 (sCD163)的产生。血清中sCD163水平升高与各种疾病条件下的低度炎症有关。 |
| 参考文献 |
|---|
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