GPCR RDC1/CXCR-7 Rabbit mAb
目录号: F2937
抗体应用：
反应性：
操作要点
蛋白定位：细胞膜, 胞内体, 内膜系统。
WB
建议使用 RIPA/NP-40 Lysis Buffer 制备裂解物。
建议 SDS-PAGE 分离胶浓度：5%。
湿转参考条件：250 mA, 180 min。
WB
建议使用 RIPA/NP-40 Lysis Buffer 制备裂解物。
建议 SDS-PAGE 分离胶浓度：5%。
湿转参考条件：250 mA, 180 min。
使用信息
| 稀释比例 |
|---|
|
| 抗体应用 |
|---|
| WB |
| 反应性 |
|---|
| Human, Mouse, Rat |
| 抗体类型 |
|---|
| Rabbit |
| 储存液配方 |
|---|
| PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3 |
| 储存条件(自收到货起) |
|---|
| -20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years |
|
预测分子量
|
|---|
|
41 kDa
|
实验方法
| WB |
|---|
实验步骤： 样品制备
1. 组织样品：破碎组织，加入适量冰冷的 RIPA/NP-40 Lysis Buffer （含蛋白酶抑制剂Cocktail），低温匀浆或置于冰上超声裂解样品，静置30 min。 2. 贴壁细胞样品：吸去培养基, 将细胞转移至EP管中。用冰冷的 PBS 清洗细胞 2 遍。加入适量冰冷的 RIPA/NP-40 Lysis Buffer （含蛋白酶抑制剂Cocktail），超声破碎，冰上静置裂解 30 min。冰上静置裂解 5 min。 3. 悬浮细胞样品：将培养基转移至离心管中离心，弃上清，用冰冷的 PBS 清洗细胞 2 遍。加入适量冰冷的 RIPA/NP-40 Lysis Buffer （含蛋白酶抑制剂Cocktail），冰上静置裂解 5 min。 4. 将所得匀浆液/裂解液置于离心机中 4°C 离心 15 min，收集上清液；
5. 取少量裂解液测定蛋白质浓度；
6. 加入蛋白上样缓冲液，将 20 µL样品在 95~100°C加热 5 min，冰上静置冷却后离心 5 min。
电泳分离
1. 根据所提蛋白的浓度，将适量蛋白样品和 Marker 上样至 SDS-PAGE 凝胶。建议分离胶（即下层胶）浓度：5 %。 SDS-PAGE 分离胶浓度选择参照表 2. 电源调 80 V, 30 min。然后电源调 110 V~150 V，观察 Marker，待蛋白所在的预染蛋白 Marker 指示带得到合适的分离后，即可停止电泳。（注意电泳时电流切勿过大，如超过 150 mA 会导致温度上升，容易影响跑胶结果。如无法避免采用大电流，可对电泳槽使用冰浴降温。）
转膜
1.拿出电转槽，把夹子和耗材浸泡在预冷电转液中；
2.用甲醇活化 PVDF 膜 1 min，用转移缓冲液冲洗；
3.按照“夹子黑边-海绵-滤纸-滤纸-胶-PVDF膜-滤纸-滤纸-海绵-夹子白边”的顺序安装好； 4.将蛋白电转移至 PVDF膜上。（推荐采用 0.45 µm PVDF 膜） PVDF 膜孔径规格选择参照表 湿转法参考条件：250 mA, 180 min。
（注意电转条件可根据蛋白大小适当调节，分子量大的蛋白适宜采用大电流，并延长转膜时间，但需要确保电转槽始终处于低温的环境中，避免凝胶融化。）
封闭
1. 电转移后，室温下用 TBST 洗膜 5 min；
2. 在封闭液中将膜孵育 1 h，室温；
3. 用 TBST 洗膜 3 次，每次 5 min。
抗体孵育 1. 用 一抗稀释液配制一抗工作液（建议一抗稀释比 1:1000），4°C 条件下与膜轻柔摇晃孵育过夜； 2. 用 TBST 洗膜 3 次，每次 5 min；
3. 在封闭液中加入二抗，室温条件下与膜轻柔摇晃孵育 1 h；
4. 孵育结束后，用 TBST 洗膜 3 次，每次 5 min。
显色
1. 加入配制好的 ECL 发光底物（或根据二抗选择其他显色基质）混合均匀；
2. 与膜孵育1 min，去除多余底物（需保持膜湿润），置于显影仪中进行曝光。
|
生物描述
| 特异性 |
|---|
| GPCR RDC1/CXCR-7 Rabbit mAb 用于检测内源性 GPCR RDC1/CXCR-7 总的蛋白水平。 |
| 别名 |
|---|
| CXCR7,GPCR RDC1 |
| 克隆号 |
|---|
| G15F11 |
| 背景 |
|---|
| CXCR7（又称 RDC1）是一种非典型的 G 蛋白偶联受体（GPCR），可结合趋化因子 CXCL12（SDF-1）和 CXCL11（I-TAC）。不同于典型的 GPCR，CXCR7 不会激活经典的 G 蛋白信号通路，而是作为清道夫受体，通过 β-抑制素介导的内吞作用内化并降解 CXCL12。这一独特机制调节趋化因子的浓度梯度，在细胞迁移、组织发育和免疫应答等过程中至关重要。通过控制 CXCL12 的可用性，CXCR7 可调节 CXCR4（CXCL12 的主要受体）的活性，微调其信号和功能响应。CXCR7 在胚胎发育中起重要作用，尤其是在心脏形态发生过程中，调控半月瓣的形成和血管重塑。此外，它在免疫细胞的迁移中具有关键作用，影响 B 细胞、T 细胞及其他白细胞在淋巴器官和炎症部位的移动。在癌症中，CXCR7 通过改变肿瘤微环境、增强 CXCR4 介导的癌细胞迁移，促进肿瘤进展、转移和血管生成。CXCR7 还能与 CXCR4 形成异二聚体，进一步调控其信号传导，影响细胞存活、增殖和趋化作用。其在发育和疾病中的作用主要通过调节 BMP（骨形态发生蛋白） 和 EGFR（表皮生长因子受体） 等信号通路来实现，这些通路影响细胞增殖和组织模式化。CXCR7 的失调与多种病理相关，包括癌症、先天性心脏缺陷和炎症性疾病。 |
| 参考文献 |
|---|
技术支持
在订购、运输、储存和使用我们的产品的任何阶段，您遇到的任何问题，均可以通过拨打我们的热线电话400-668-6834，或者技术支持邮箱tech@selleck.cn，直接联系到我们。我们会在24小时内尽快联系您。
* 必填项
