GUCY1B3 Rabbit mAb

目录号: F3213

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    使用信息

    稀释比例
    1:1000
    1:400
    抗体应用
    WB, IHC
    抗体类型
    Rabbit
    反应性
    Human, Mouse, Rat
    储存液配方
    PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3
    储存条件(自收到货起)
    -20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years
    预测分子量
    实际分子量
    24 kDa, 38 kDa, 52 kDa, 60 kDa, 68 kDa, 70 kDa, 71 kDa
    38 kDa, 65 kDa, 80 kDa
    *为什么预测分子量和实际分子量会有不同?
    以下原因可能会导致蛋白分子量与预测不同:翻译后修饰(磷酸化/糖基化);剪接变体和异构体;相对电荷;多聚体。

    实验方法

    IHC
    实验步骤:
     
    脱蜡/补液
    1. 脱蜡/水合切片:
    2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次,每次 5 分钟。
    3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次,每次 10 分钟。
    4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次,每次 10 分钟。
    5. 用 dH2O 清洗切片两次,每次 5 分钟。
    6.抗原修复:对于柠檬酸盐:将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中,在微波炉中加热,直至开始沸腾; 在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。 在工作台上冷却玻片 30 分钟。
     
    染色
    1. 用 dH2O 清洗切片 3 次,每次 5 分钟。
    2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。
    3. 用 dH2O 清洗切片两次,每次 5 分钟。
    4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。
    5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。
    6. 除去封闭液,并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。
    7. 去除抗体溶液,用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次,每次 5 分钟。
    8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。 在加湿室中室温孵育 30 分钟。
    9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次,每次 5 分钟。
    10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。
    11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。
    12. 将载玻片浸入 dH2O 中。
    13. 如果需要,用苏木精复染切片。
    14. 用 dH2O 清洗切片两次,每次 5 分钟。
    15. 切片脱水:95%乙醇孵育切片两次,每次 10 秒; 在 100% 乙醇中重复,孵育切片两次,每次 10 秒; 在二甲苯中重复,孵育切片两次,每次 10 秒。
    22. 用盖玻片和封固剂封固切片。
     

    Datasheet & SDS

    生物描述

    特异性
    GUCY1B3 Rabbit mAb 用于检测内源性 GUCY1B3 总的蛋白水平。本抗体未经小鼠和大鼠 IHC 实验验证。
    克隆号
    G11K4
    背景
    GUCY1B3是可溶性鸟苷酸环化酶(sGC)的β亚基,在一氧化碳(NO)-sGC-环鸟苷酸(cGMP)信号通路中发挥关键作用,该通路对于心血管功能至关重要。GUCY1B3催化GTP转化为cGMP,后者作为第二信使调控血管张力、心肌细胞的收缩性以及细胞存活。在心肌梗死(MI)和缺血/再灌注(IR)损伤期间,GUCY1B3表达上调,并通过激活PKCε/Akt信号通路减少心肌细胞凋亡、促进细胞存活,从而发挥心脏保护作用。它还增强内皮细胞增殖和新血管形成,有助于心肌梗死后心脏修复。GUCY1B3的调控异常与梗死面积扩大和心脏功能受损相关。
    参考文献

    技术支持

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