Human Nucleoli Mouse mAb
目录号: F2806
使用信息
| 稀释比例 |
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| 抗体应用 |
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| WB, IHC, IF, FCM |
| 抗体类型 |
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| Mouse |
| 反应性 |
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| Human |
| 储存液配方 |
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| PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3 |
| 储存条件(自收到货起) |
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| -20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years |
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预测分子量
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100 kDa
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实验方法
| IF |
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| IHC |
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实验步骤：
脱蜡/补液
1. 脱蜡/水合切片：
2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。
3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。
4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。
5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾； 在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。 在工作台上冷却玻片 30 分钟。
染色
1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。
2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。
3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。
5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。
6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。
7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。 在加湿室中室温孵育 30 分钟。
9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。
11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。
12. 将载玻片浸入 dH2O 中。
13. 如果需要，用苏木精复染切片。
14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒； 在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒； 在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。
22. 用盖玻片和封固剂封固切片。
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生物描述
| 特异性 |
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| Human Nucleoli mAb 用于检测内源性 Human Nucleoli 总的蛋白水平。本抗体不建议应用于小鼠和大鼠的 WB、IHC 实验。 |
| 克隆号 |
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| A12F22 |
| 背景 |
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| 人类核仁是一个动态、多功能的细胞核结构，主要参与核糖体 RNA（rRNA）及核糖体蛋白的合成、加工与组装。它围绕着核仁组织区（NORs）形成，这些区域是位于特定染色体上的核糖体 DNA（rDNA）基因簇。核仁通常被划分为三个亚区：纤维中心（FC）、致密纤维组分（DFC）和颗粒组分（GC）。这些区域由多个与各自染色体相连的受限区域构成，确保了核糖体的高效生成和基因组的有序组织。核仁还作为应激感知、细胞周期调控及其他核糖核蛋白颗粒生物合成的中心，并通过影响 rDNA 转录、染色质结构及核仁相关域（NADs）在基因组组织和表观遗传调控中发挥作用。核仁功能的失调与多种疾病有关，包括癌症、神经退行性疾病以及遗传性核糖体病。 |
| 参考文献 |
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