IKK β (K18H24) Rabbit mAb

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    使用信息

    稀释比例
    1:1000
    1:100-1:250
    抗体应用
    WB, IHC
    抗体类型
    Rabbit
    反应性
    Human, Mouse
    储存液配方
    PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3
    储存条件(自收到货起)
    -20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years
    预测分子量
    实际分子量
    51 kDa, 87 kDa
    90 kDa
    *为什么预测分子量和实际分子量会有不同?
    以下原因可能会导致蛋白分子量与预测不同:翻译后修饰(磷酸化/糖基化);剪接变体和异构体;相对电荷;多聚体。

    实验方法

    IHC
    实验步骤:
     
    脱蜡/补液
    1. 脱蜡/水合切片:
    2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次,每次 5 分钟。
    3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次,每次 10 分钟。
    4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次,每次 10 分钟。
    5. 用 dH2O 清洗切片两次,每次 5 分钟。
    6.抗原修复:对于柠檬酸盐:将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中,在微波炉中加热,直至开始沸腾; 在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。 在工作台上冷却玻片 30 分钟。
     
    染色
    1. 用 dH2O 清洗切片 3 次,每次 5 分钟。
    2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。
    3. 用 dH2O 清洗切片两次,每次 5 分钟。
    4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。
    5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。
    6. 除去封闭液,并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。
    7. 去除抗体溶液,用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次,每次 5 分钟。
    8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。 在加湿室中室温孵育 30 分钟。
    9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次,每次 5 分钟。
    10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。
    11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。
    12. 将载玻片浸入 dH2O 中。
    13. 如果需要,用苏木精复染切片。
    14. 用 dH2O 清洗切片两次,每次 5 分钟。
    15. 切片脱水:95%乙醇孵育切片两次,每次 10 秒; 在 100% 乙醇中重复,孵育切片两次,每次 10 秒; 在二甲苯中重复,孵育切片两次,每次 10 秒。
    22. 用盖玻片和封固剂封固切片。
     

    Datasheet & SDS

    生物描述

    特异性
    IKK β (K18H24) Rabbit mAb 用于检测内源性 IKK β 总的蛋白水平。
    别名
    IKKbeta,IKKβ
    克隆号
    K18H24
    背景
    IKKβ(核因子 κB 抑制因子激酶亚基 β) 是由 IKBKB 基因编码的丝氨酸/苏氨酸激酶,是 IKK 复合物的关键催化亚基,在炎症刺激、应激和感染响应中的 NF-κB 信号通路调控中发挥核心作用。IKKβ 结构包括:激酶结构域(KD):执行磷酸化活性;泛素样结构域(ULD):决定底物特异性;支架/二聚化结构域(SDD):与 IKKα 和 NEMO(IKKγ)相互作用。IKKβ 在免疫细胞中高度表达,可被细胞因子(如 TNF-α、IL-1)、微生物产物(如 LPS)和细胞应激激活。其主要功能是通过磷酸化 IκBα(Ser32 和 Ser36),触发其降解,使 NF-κB 进入细胞核,促进炎症、免疫反应、细胞存活和增殖。此外,IKKβ 还通过调控胰岛素抵抗和葡萄糖稳态,将炎症与代谢疾病联系在一起。由于其在慢性炎症和癌症中的作用,IKKβ 是治疗炎症性疾病、代谢紊乱和癌症的潜在靶点。
    参考文献

    技术支持

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