Oct-4A Rabbit mAb
目录号: F3068
使用信息
| 稀释比例 |
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| 抗体应用 |
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| WB, IHC, IF, FCM, ChIP |
| 抗体类型 |
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| Rabbit |
| 反应性 |
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| Human |
| 储存液配方 |
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| PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3 |
| 储存条件(自收到货起) |
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| -20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years |
| 预测分子量 实际分子量 |
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| 45 kDa 45 kDa |
| *为什么预测分子量和实际分子量会有不同？ 以下原因可能会导致蛋白分子量与预测不同：翻译后修饰（磷酸化/糖基化）；剪接变体和异构体；相对电荷；多聚体。 |
实验方法
| IF |
|---|
| IHC |
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实验步骤：
脱蜡/补液
1. 脱蜡/水合切片：
2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。
3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。
4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。
5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾； 在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。 在工作台上冷却玻片 30 分钟。
染色
1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。
2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。
3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。
5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。
6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。
7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。 在加湿室中室温孵育 30 分钟。
9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。
11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。
12. 将载玻片浸入 dH2O 中。
13. 如果需要，用苏木精复染切片。
14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒； 在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒； 在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。
22. 用盖玻片和封固剂封固切片。
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生物描述
| 特异性 |
|---|
| Oct-4A Rabbit mAb 用于检测内源性 Oct-4A 总的蛋白水平。 |
| 克隆号 |
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| P1G10 |
| 背景 |
|---|
| Oct-4A（由POU5F1基因编码）是POU家族的转录因子，在维持胚胎干细胞的多能性和自我更新中发挥关键作用。其结构包括N 端转录激活结构域（133 个氨基酸）、POU 结构域（156 个氨基酸）（包含 POU 特异性区域和 DNA 结合的同源域），以及C 端转录激活结构域（71 个氨基酸）。Oct-4A 主要表达于胚胎干细胞及早期胚胎发育阶段，调控与多能性相关的基因。在成年组织中，其表达水平较低，但在某些癌细胞中仍可检测到，并可能促进肿瘤发生。在功能上，Oct-4A 通过与ATGCAAAT 八聚体序列结合，并与 Sox2 等转录因子形成异二聚体，以调控基因表达。其重编程体细胞为诱导性多能干细胞（iPSCs）的能力，使其成为再生医学和干细胞治疗中的关键因子。 |
| 参考文献 |
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