SFPQ Rabbit mAb
目录号: F3147
使用信息
| 稀释比例 |
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| 抗体应用 |
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| WB, IHC, IF, FCM |
| 抗体类型 |
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| Rabbit |
| 反应性 |
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| Human, Mouse, Rat |
| 储存液配方 |
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| PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3 |
| 储存条件(自收到货起) |
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| -20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years |
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预测分子量
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76 kDa
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实验方法
| IF |
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| IHC |
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实验步骤：
脱蜡/补液
1. 脱蜡/水合切片：
2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。
3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。
4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。
5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾； 在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。 在工作台上冷却玻片 30 分钟。
染色
1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。
2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。
3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。
5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。
6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。
7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。 在加湿室中室温孵育 30 分钟。
9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。
11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。
12. 将载玻片浸入 dH2O 中。
13. 如果需要，用苏木精复染切片。
14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒； 在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒； 在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。
22. 用盖玻片和封固剂封固切片。
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生物描述
| 特异性 |
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| SFPQ Rabbit mAb 用于检测内源性 SFPQ 总的蛋白水平。 |
| 克隆号 |
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| H15F20 |
| 背景 |
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| SFPQ（剪接因子富含脯氨酸和谷氨酰胺）是一种多功能RNA结合蛋白，在转录及转录后调控中发挥关键作用，包括RNA剪接、DNA修复以及核内寄生颗粒的形成。作为DBHS蛋白家族的成员，SFPQ通过与核酸和蛋白质的相互作用整合多种细胞通路，维持基因表达和基因组稳定性。SFPQ对于神经发育至关重要，其缺失会导致严重的神经发育缺陷，如轴突生长受阻和大脑边界形成异常。它抑制隐匿性末端外显子（CLEs），防止过早终止转录产生无功能蛋白。SFPQ主要定位于细胞核，但在病理条件下可能错误地定位到细胞质中，形成与ALS、阿尔茨海默病和额颞叶痴呆（FTD）等神经退行性疾病相关的聚集体。它还参与应激颗粒的形成、tau同种型调控，以及与TDP-43、FUS等疾病相关RNA结合蛋白的相互作用。在癌症中，SFPQ的调控异常会影响RNA运输、DNA修复，并与长链非编码RNA相互作用，从而通过确保RNA的正确加工和防止异常剪接事件来维护基因表达和细胞内稳态的完整性。 |
| 参考文献 |
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