SSB Mouse mAb
目录号: F2968
使用信息
| 稀释比例 |
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| 抗体应用 |
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| WB, IP, IHC, IF, FCM |
| 抗体类型 |
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| Mouse |
| 反应性 |
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| Human |
| 储存液配方 |
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| PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3 |
| 储存条件(自收到货起) |
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| -20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years |
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预测分子量
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46 kDa
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实验方法
| IF |
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| IHC |
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实验步骤：
脱蜡/补液
1. 脱蜡/水合切片：
2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。
3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。
4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。
5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾； 在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。 在工作台上冷却玻片 30 分钟。
染色
1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。
2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。
3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。
5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。
6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。
7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。 在加湿室中室温孵育 30 分钟。
9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。
11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。
12. 将载玻片浸入 dH2O 中。
13. 如果需要，用苏木精复染切片。
14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒； 在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒； 在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。
22. 用盖玻片和封固剂封固切片。
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生物描述
| 特异性 |
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| SSB mAb 用于检测内源性 SSB 总的蛋白水平。 |
| 别名 |
|---|
| La Antigen,SSB |
| 克隆号 |
|---|
| P11E14 |
| 背景 |
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| 单链 DNA 结合蛋白（SSBs）是基因组完整性的重要守护者，在 DNA 复制、修复、重组以及端粒维护中发挥着核心作用。这些蛋白专门结合单链 DNA（ssDNA），防止其形成有害的二级结构（如发夹结构），并保护其不被核酸酶降解。从结构上看，SSBs 通常含有 OB 折叠结构域，使其能够以高亲和力结合 ssDNA。在细菌中，例如大肠杆菌中的 SSBs 通常以四聚体形式发挥作用，而在真核生物中，像复制蛋白 A（RPA）这样的 SSBs 则形成异三聚体，在 DNA 复制和修复过程中稳定 ssDNA。SSBs 还通过招募修复蛋白和稳定受损 DNA 来促进 DNA 修复通路，包括碱基切除修复（BER）和同源重组。此外，诸如 POT1 及 CST 复合体等特化的 SSBs 保护端粒 ssDNA，调控端粒的长度与功能。通过与 DNA 聚合酶、解旋酶及检查点蛋白的协同作用，SSBs 确保了 DNA 相关过程的高效进行，并维护了基因组的稳定性。 |
| 参考文献 |
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