Thymidine Kinase 1/TK1 Rabbit mAb
目录号: F2360
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Lane 1 : MOLT-4
Lane 2 : U-2 OS
Lane 3 : Jurkat
Lane 4 : SW620
使用信息
| 稀释比例 |
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| 抗体应用 |
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| WB, IP, IHC, FCM |
| 抗体类型 |
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| Rabbit |
| 反应性 |
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| Human |
| 储存液配方 |
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| PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3 |
| 储存条件(自收到货起) |
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| -20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years |
| 预测分子量 |
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| 25 Kda |
实验方法
| IHC |
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实验步骤：
脱蜡/补液
1. 脱蜡/水合切片：
2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。
3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。
4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。
5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾； 在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。 在工作台上冷却玻片 30 分钟。
染色
1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。
2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。
3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。
5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。
6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。
7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。 在加湿室中室温孵育 30 分钟。
9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。
11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。
12. 将载玻片浸入 dH2O 中。
13. 如果需要，用苏木精复染切片。
14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒； 在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒； 在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。
16. 用盖玻片和封固剂封固切片。
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生物描述
| 特异性 |
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Thymidine Kinase 1/TK1 Rabbit mAb 可检测内源性 Thymidine Kinase 1/TK1 总的蛋白水平。 |
| 别名 |
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| Thymidine Kinase 1,TK1 |
| 克隆号 |
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| H23D16 |
| 背景 |
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胸苷激酶 1 (TK1) 是 DNA 挽救途径中的关键酶，可将胸苷转化为胸苷单磷酸 (dTMP)，这对 DNA 复制和修复至关重要。它通过确保核苷酸的可用性在 DNA 修复中起着至关重要的作用，其活性在细胞周期的 S 期达到峰值。TK1 受 RB/E2F 途径和翻译后修饰的调控，可根据细胞的需求进行精确控制。TK1 水平升高是肺癌、乳腺癌和结肠癌等癌症的重要生物标志物，可作为诊断和预后的可靠指标。在许多情况下，TK1 由于调控机制的丧失而过度表达，导致其积累并可能促进癌症进展。它的调控与细胞周期检查点密切相关，其中 p53 和 p21 等蛋白质起着关键作用。其降解或稳定性的破坏会促进肿瘤发展。 |
| 参考文献 |
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