AMPA Receptor 2 (GluA2) Rabbit mAb
目录号: F1223
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Lane 1: Mouse brain
Lane 2: Rat brain
Lane 3: Human cortex
操作要点
WB
蛋白定位
细胞膜；内膜；突触后膜；突触
建议使用 RIPA/NP-40 裂解。
使用信息
| 稀释比例 |
|---|
|
| 抗体应用 |
|---|
| WB, IP |
| 抗体类型 |
|---|
| Rabbit |
| 反应性 |
|---|
| Human, Mouse, Rat |
| 储存液配方 |
|---|
| PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3 |
| 储存条件(自收到货起) |
|---|
| –20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years |
| 预测分子量 |
|---|
| 100 kDa |
| 阳性对照 | Mouse brain; Rat brain; Human cortex |
|---|---|
| 阴性对照 |
实验方法
| WB |
|---|
Western Blotting
样品制备
1. 吸去培养基,用1X PBS清洗细胞。
2. 加入1X SDS上样缓冲液裂解细胞,将提取物转移至微量离心管中。置于冰上。
3. 超声10–15秒,完成细胞裂解和DNA剪切。
4. 将20 µl样品在95–100°C加热5分钟,然后置于冰上冷却。
5. 离心5分钟(使用微量离心机)。
6. 将适量样品上样至SDS-PAGE凝胶(上样量取决于提取蛋白浓度)。注意:同时请上样预染分子量标准,以确定分子量并验证电转效果。
7. 电转至硝酸纤维素膜/PVDF膜(湿转法参考条件: 200mA 120min)。
膜封闭与抗体孵育
a. 封闭
1. (可选)转膜完成后,用TBS室温洗膜5分钟。
2. 将膜在封闭液中室温孵育1小时。
3. 用TBST洗涤3次,每次5分钟。
b. 抗体孵育
1. 将膜与一抗(按推荐的稀释度和稀释液配制)置于一抗稀释缓冲液中,4°C温和摇床过夜孵育。
2. 用TBST洗涤3次,每次5分钟。
3. 将膜与适当的二抗(稀释于封闭液中)在室温下温和摇床孵育1小时。
4. 用TBST洗涤3次,每次5分钟。
5. 进行检测。
显影检测
1. 抗体孵育结束后,用TBST洗膜3次,每次5分钟。
2. 配制ECL发光试剂(或根据二抗类型选择其他显色剂/底物)。混匀。
3. 将底物与膜孵育1分钟,去除多余溶液(膜保持湿润),置于显影仪中进行曝光。 |
生物描述
| 特异性 |
|---|
AMPA Receptor 2 (GluA2) Rabbit mAb识别内源性的总GluA2蛋白。基于抗原的序列同源性，该抗体不识别其他AMPA受体亚基(如GluA1, GluA3或GluA4)。 |
| 别名 |
|---|
| AMPA Receptor 2,GluA2/GluR2 glutamate receptor,GluR2,Ionotropic Glutamate receptor 2 |
| Uniprot ID |
|---|
| P42262 |
| 克隆号 |
|---|
| K20E12 |
| 背景 |
|---|
AMPA 亚型谷氨酸受体 (AMPAR) 是快速兴奋性突触传递的关键介质，对长期突触可塑性至关重要，包括长期增强 (LTP) 和长期抑制 (LTD)，它们是学习和记忆的模型。在海马 CA1 锥体神经元中，大多数 AMPAR 是 GluA1 和 GluA2 亚基的异源复合物。GluA2 亚基影响 AMPAR 的关键特性，例如 Ca2+ 通透性、单通道电导和受体运输。 GluA2 与 N-钙粘蛋白之间的相互作用对于代谢型谷氨酸受体依赖性 LTD (mGluR-LTD) 至关重要，这是通过依赖肌动蛋白丝切蛋白的肌动蛋白重组实现的。GluA2/N-钙粘蛋白相互作用对肌动蛋白相关过程的调节为 AMPAR 提供了一种机制，可影响中枢突触的长期突触可塑性。 |
| 参考文献 |
|---|
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