Anti-GLP-1 Mouse Antibody [B23D23]

目录号: F1621

抗体应用：反应性：Mouse, Human

Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human pancreas tissue with F1621 at 1:500 dilution.,
Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human pancreas tissue with F1621 at 1:500 dilution.,

规格	价格	库存
20uL	790	现货
50uL	1240	现货
100uL	1990	现货
100uL*2	3790	现货
400-668-6834 info@selleck.cn

使用信息

稀释比例
IHC1:2000

抗体应用
IHC, sELISA

反应性
Mouse, Human

抗体类型
Mouse

储存液配方
PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3

储存条件(自收到货起)
-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

阳性对照	Human pancreas tissue; Diabetic mice pancreas tissue
阴性对照

实验方法

IHC
实验步骤：脱蜡/补液 1. 脱蜡/水合切片： 2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。 3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。 4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。 5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。 6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾；在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。在工作台上冷却玻片 30 分钟。染色 1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。 2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。 3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。 4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。 5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。 6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。 7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。 8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。在加湿室中室温孵育 30 分钟。 9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。 10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。 11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。 12. 将载玻片浸入 dH2O 中。 13. 如果需要，用苏木精复染切片。 14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。 15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒；在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒；在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。 16. 用盖玻片和封固剂封固切片。

IHC

实验步骤：

脱蜡/补液

1. 脱蜡/水合切片：

2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。

3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。

4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。

5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。

6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾；在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。在工作台上冷却玻片 30 分钟。

染色

1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。

2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。

3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。

4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。

5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。

6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。

7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。

8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。在加湿室中室温孵育 30 分钟。

9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。

10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。

11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。

12. 将载玻片浸入 dH2O 中。

13. 如果需要，用苏木精复染切片。

14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。

15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒；在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒；在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。

16. 用盖玻片和封固剂封固切片。

Datasheet & SDS

生物描述

特异性
Anti-GLP-1 Mouse Antibody [B23D23] 可检测内源性 GLP-1 总蛋白水平。

蛋白定位
细胞外环境

Uniprot ID
P01275

克隆号
B23D23

别名
Pro-glucagon, GCG

背景
胰高血糖素样肽-1 (GLP-1) 是一种由 30 个氨基酸组成的肠促胰岛素激素，主要由肠道 L 细胞在营养摄入后分泌，由胰高血糖素原前体经酶促裂解而产生。GLP-1 含有对受体激活至关重要的保守 N 端序列，包括对结合和信号传导至关重要的关键残基（例如 His7），并采用 α 螺旋构象，以稳定其与 GLP-1 受体 (GLP-1R) 的相互作用。GLP-1R 是一种 G 蛋白偶联受体，在胰腺 β 细胞、脑、胃肠道和其他组织中表达。 GLP-1R 结合后，该受体激活 G 蛋白，刺激腺苷酸环化酶，增加细胞内 cAMP，进而激活下游效应分子，如蛋白激酶 A (PKA) 和 Epac2，增强葡萄糖依赖性胰岛素分泌，主要通过 δ 细胞分泌生长抑素来抑制胰高血糖素释放，并减缓胃排空以控制餐后血糖水平。GLP-1 还通过中枢神经系统通路降低食欲、增强饱腹感。GLP-1R 激活可通过 cAMP/PKA 和 ERK 信号通路调节炎症并促进神经元存活，从而发挥神经保护作用。此外，GLP-1 还影响肌肉和神经元细胞的线粒体功能和能量代谢，并通过调节骨保护素 (OPG)/RANKL 比例来促进骨形成，从而维持骨骼健康。内源性 GLP-1 被二肽基肽酶 4 (DPP-4) 快速降解，将其半衰期限制至约 1-2 分钟，促使开发 GLP-1 受体激动剂和 DPP-4 抑制剂作为 2 型糖尿病和肥胖症的治疗药物。

背景

胰高血糖素样肽-1 (GLP-1) 是一种由 30 个氨基酸组成的肠促胰岛素激素，主要由肠道 L 细胞在营养摄入后分泌，由胰高血糖素原前体经酶促裂解而产生。GLP-1 含有对受体激活至关重要的保守 N 端序列，包括对结合和信号传导至关重要的关键残基（例如 His7），并采用 α 螺旋构象，以稳定其与 GLP-1 受体 (GLP-1R) 的相互作用。GLP-1R 是一种 G 蛋白偶联受体，在胰腺 β 细胞、脑、胃肠道和其他组织中表达。 GLP-1R 结合后，该受体激活 G 蛋白，刺激腺苷酸环化酶，增加细胞内 cAMP，进而激活下游效应分子，如蛋白激酶 A (PKA) 和 Epac2，增强葡萄糖依赖性胰岛素分泌，主要通过 δ 细胞分泌生长抑素来抑制胰高血糖素释放，并减缓胃排空以控制餐后血糖水平。GLP-1 还通过中枢神经系统通路降低食欲、增强饱腹感。GLP-1R 激活可通过 cAMP/PKA 和 ERK 信号通路调节炎症并促进神经元存活，从而发挥神经保护作用。此外，GLP-1 还影响肌肉和神经元细胞的线粒体功能和能量代谢，并通过调节骨保护素 (OPG)/RANKL 比例来促进骨形成，从而维持骨骼健康。内源性 GLP-1 被二肽基肽酶 4 (DPP-4) 快速降解，将其半衰期限制至约 1-2 分钟，促使开发 GLP-1 受体激动剂和 DPP-4 抑制剂作为 2 型糖尿病和肥胖症的治疗药物。

参考文献
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21950636/ https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/39289339/

PVDF膜孔径规格选择参照表

Protein Size (kDa)	PVDF Transfer Membrane Pore Size (μm)
< 10	0.22
10-20	0.22
20-30	0.45
30-45	0.45
45-70	0.45
80-100	0.45
100-140	0.45
> 140	0.45

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* 必填项

Protein Size (kDa)	Separating Gel Percentage
4-40	20%
12-45	15%
10-70	12.5%
15-100	10%
25-100	8%
60-210	5%