Anti-MCP1 Rat Antibody [M3B19]

目录号: F3225

抗体应用：反应性：Mouse

Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded mouse testicles tissue with F3225 at 1:10 dilution.,
Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded mouse testicles tissue with F3225 at 1:10 dilution.,

规格	价格	库存
20uL	790	现货
50uL	1240	现货
100uL	1990	现货
100uL*2	3790	现货
400-668-6834 info@selleck.cn

使用信息

稀释比例

抗体应用
IHC

反应性
Mouse

抗体类型
Rat

储存液配方
PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3

储存条件(自收到货起)
-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

预测分子量
11 kDa

阳性对照	Mouse testis
阴性对照

实验方法

IHC
实验步骤：脱蜡/补液 1. 脱蜡/水合切片： 2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。 3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。 4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。 5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。 6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾；在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。在工作台上冷却玻片 30 分钟。染色 1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。 2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。 3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。 4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。 5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。 6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。 7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。 8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。在加湿室中室温孵育 30 分钟。 9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。 10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。 11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。 12. 将载玻片浸入 dH2O 中。 13. 如果需要，用苏木精复染切片。 14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。 15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒；在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒；在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。 16. 用盖玻片和封固剂封固切片。

IHC

实验步骤：

脱蜡/补液

1. 脱蜡/水合切片：

2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。

3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。

4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。

5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。

6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾；在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。在工作台上冷却玻片 30 分钟。

染色

1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。

2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。

3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。

4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。

5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。

6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。

7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。

8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。在加湿室中室温孵育 30 分钟。

9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。

10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。

11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。

12. 将载玻片浸入 dH2O 中。

13. 如果需要，用苏木精复染切片。

14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。

15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒；在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒；在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。

16. 用盖玻片和封固剂封固切片。

Datasheet & SDS

生物描述

特异性
Anti-MCP1 Rat Antibody [M3B19] 可检测内源性 MCP1 总蛋白水平。

蛋白定位
细胞外环境

Uniprot ID
P10148

克隆号
M3B19

别名
Je, Mcp1, Scya2, Ccl2, C-C motif chemokine 2, Monocyte chemoattractant protein 1, Monocyte chemotactic protein 1, Platelet-derived growth factor-inducible protein JE, Small-inducible cytokine A2, MCP-1

背景
单核细胞趋化蛋白-1 (MCP-1/CCL2) 是CC趋化因子家族的成员，是单核细胞的强效趋化因子。它被认为与JE基因相同，JE基因最初在小鼠成纤维细胞中被鉴定，并由血小板衍生的生长因子诱导。人类MCP-1基因位于17q11.2染色体上，编码一个由76个氨基酸组成的蛋白质，分子量约为13 kDa。MCP-1属于趋化因子亚家族，该亚家族至少包含四个成员：MCP-1、MCP-2、MCP-3和MCP-4。CCL2由多种细胞类型产生，这些细胞类型既可以组成性产生，也可以响应氧化应激、细胞因子和生长因子等刺激而产生。其来源包括内皮细胞、成纤维细胞、上皮细胞、平滑肌细胞、系膜细胞、星形胶质细胞、单核细胞和小胶质细胞——这些细胞类型在循环系统和组织中的抗病毒免疫防御中发挥着重要作用。功能上，CCL2 指导单核细胞、记忆 T 细胞和自然杀伤 (NK) 细胞的迁移和浸润。CCL2 的生物学效应由其受体 CCR2 介导，CCR2 的表达与 CCL2 相比更为受限。CCR2 有两种剪接异构体：CCR2A 和 CCR2B，它们仅在 C 末端区域有所不同。

背景

单核细胞趋化蛋白-1 (MCP-1/CCL2) 是CC趋化因子家族的成员，是单核细胞的强效趋化因子。它被认为与JE基因相同，JE基因最初在小鼠成纤维细胞中被鉴定，并由血小板衍生的生长因子诱导。人类MCP-1基因位于17q11.2染色体上，编码一个由76个氨基酸组成的蛋白质，分子量约为13 kDa。MCP-1属于趋化因子亚家族，该亚家族至少包含四个成员：MCP-1、MCP-2、MCP-3和MCP-4。CCL2由多种细胞类型产生，这些细胞类型既可以组成性产生，也可以响应氧化应激、细胞因子和生长因子等刺激而产生。其来源包括内皮细胞、成纤维细胞、上皮细胞、平滑肌细胞、系膜细胞、星形胶质细胞、单核细胞和小胶质细胞——这些细胞类型在循环系统和组织中的抗病毒免疫防御中发挥着重要作用。功能上，CCL2 指导单核细胞、记忆 T 细胞和自然杀伤 (NK) 细胞的迁移和浸润。CCL2 的生物学效应由其受体 CCR2 介导，CCR2 的表达与 CCL2 相比更为受限。CCR2 有两种剪接异构体：CCR2A 和 CCR2B，它们仅在 C 末端区域有所不同。

参考文献
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19441883/

PVDF膜孔径规格选择参照表

Protein Size (kDa)	PVDF Transfer Membrane Pore Size (μm)
< 10	0.22
10-20	0.22
20-30	0.45
30-45	0.45
45-70	0.45
80-100	0.45
100-140	0.45
> 140	0.45

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* 必填项

Protein Size (kDa)	Separating Gel Percentage
4-40	20%
12-45	15%
10-70	12.5%
15-100	10%
25-100	8%
60-210	5%