Anti-Nav1.7 Mouse Antibody [P22E18]

目录号: F3300

抗体应用：反应性：Mouse

Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human colorectal cancer tissue with F3300 at 1:200 dilution.,
Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human colorectal cancer tissue with F3300 at 1:200 dilution.,

规格	价格	库存
20uL	790	现货
50uL	1240	现货
100uL	1990	现货
100uL*2	3790	现货
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使用信息

稀释比例
IHC1:200-1:1000

抗体应用
IHC

反应性
Mouse

抗体类型
Mouse

储存液配方
PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3

储存条件(自收到货起)
-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

阳性对照	Mouse back skin
阴性对照

实验方法

IHC
实验步骤：脱蜡/补液 1. 脱蜡/水合切片： 2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。 3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。 4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。 5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。 6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾；在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。在工作台上冷却玻片 30 分钟。染色 1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。 2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。 3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。 4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。 5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。 6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。 7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。 8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。在加湿室中室温孵育 30 分钟。 9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。 10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。 11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。 12. 将载玻片浸入 dH2O 中。 13. 如果需要，用苏木精复染切片。 14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。 15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒；在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒；在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。 16. 用盖玻片和封固剂封固切片。

IHC

实验步骤：

脱蜡/补液

1. 脱蜡/水合切片：

2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。

3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。

4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。

5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。

6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾；在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。在工作台上冷却玻片 30 分钟。

染色

1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。

2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。

3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。

4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。

5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。

6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。

7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。

8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。在加湿室中室温孵育 30 分钟。

9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。

10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。

11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。

12. 将载玻片浸入 dH2O 中。

13. 如果需要，用苏木精复染切片。

14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。

15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒；在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒；在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。

16. 用盖玻片和封固剂封固切片。

Datasheet & SDS

生物描述

特异性
Anti-Nav1.7 Mouse Antibody [P22E18] 可检测内源性 Nav1.7 总蛋白水平。

蛋白定位
细胞膜，细胞突起，内膜系统

Uniprot ID
Q15858

克隆号
P22E18

别名
NENA, SCN9A, Sodium channel protein type 9 subunit alpha, Neuroendocrine sodium channel, Peripheral sodium channel 1, Sodium channel protein type IX subunit alpha, Voltage-gated sodium channel subunit alpha Nav1.7, hNE-Na, PN1

背景
NaV1.7是一个由SCN9A基因编码的电压门控钠通道，主要在外周感觉神经元中表达，包括小直径的痛觉背根神经节（DRG）神经元、三叉神经节神经元和交感神经元。结构上，NaV1.7由一个构成离子传导孔的大α亚基组成，该孔被组织成四个同源结构域（DI-DIV），每个结构域包含六个跨膜片段（S1-S6），并具有电压敏感区（S4）和一个赋予钠特异性的选择性过滤器；它也可能与调节门控和表达的β亚基相关。功能上，NaV1.7在放大接近静息膜电位的缓慢小去极化以及设定动作电位起始阈值方面起着至关重要的作用，在痛觉神经元中充当“阈值通道”。 SCN9A基因的功能获得性突变会导致痛觉感受器过度兴奋，从而引发遗传性疼痛综合征，例如遗传性红斑性肢痛症 (IEM) 和阵发性剧烈疼痛障碍 (PEPD)；而功能丧失性突变则会导致先天性痛觉不敏感。NaV1.7基因通过低阈值激活和缓慢失活动力学，严格调控神经元兴奋性，是疼痛治疗的主要药理靶点。

背景

NaV1.7是一个由SCN9A基因编码的电压门控钠通道，主要在外周感觉神经元中表达，包括小直径的痛觉背根神经节（DRG）神经元、三叉神经节神经元和交感神经元。结构上，NaV1.7由一个构成离子传导孔的大α亚基组成，该孔被组织成四个同源结构域（DI-DIV），每个结构域包含六个跨膜片段（S1-S6），并具有电压敏感区（S4）和一个赋予钠特异性的选择性过滤器；它也可能与调节门控和表达的β亚基相关。功能上，NaV1.7在放大接近静息膜电位的缓慢小去极化以及设定动作电位起始阈值方面起着至关重要的作用，在痛觉神经元中充当“阈值通道”。 SCN9A基因的功能获得性突变会导致痛觉感受器过度兴奋，从而引发遗传性疼痛综合征，例如遗传性红斑性肢痛症 (IEM) 和阵发性剧烈疼痛障碍 (PEPD)；而功能丧失性突变则会导致先天性痛觉不敏感。NaV1.7基因通过低阈值激活和缓慢失活动力学，严格调控神经元兴奋性，是疼痛治疗的主要药理靶点。

参考文献
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/39378238/

PVDF膜孔径规格选择参照表

Protein Size (kDa)	PVDF Transfer Membrane Pore Size (μm)
< 10	0.22
10-20	0.22
20-30	0.45
30-45	0.45
45-70	0.45
80-100	0.45
100-140	0.45
> 140	0.45

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* 必填项

Protein Size (kDa)	Separating Gel Percentage
4-40	20%
12-45	15%
10-70	12.5%
15-100	10%
25-100	8%
60-210	5%