Anti-TSH Receptor/TSH-R Rabbit Antibody [L10M22]

目录号: F3696

抗体应用：反应性：Human

Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human thyroid gland tissue with F3696 at 1:1000 dilution.,
Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human thyroid gland tissue with F3696 at 1:1000 dilution.,

规格	价格	库存
20uL	790	现货
50uL	1240	现货
100uL	1990	现货
100uL*2	3790	现货
400-668-6834 info@selleck.cn

使用信息

稀释比例
IHC1:1000

抗体应用
IHC

反应性
Human

抗体类型
Rabbit

储存液配方
PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3

储存条件(自收到货起)
-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

阳性对照	Human thyroid; Human follicular thyroid adenocarcinoma; Human papillary thyroid adenocarcinoma
阴性对照	Human colon; Human gastric cancer

实验方法

IHC
实验步骤：脱蜡/补液 1. 脱蜡/水合切片： 2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。 3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。 4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。 5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。 6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾；在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。在工作台上冷却玻片 30 分钟。染色 1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。 2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。 3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。 4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。 5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。 6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。 7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。 8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。在加湿室中室温孵育 30 分钟。 9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。 10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。 11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。 12. 将载玻片浸入 dH2O 中。 13. 如果需要，用苏木精复染切片。 14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。 15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒；在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒；在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。 16. 用盖玻片和封固剂封固切片。

IHC

实验步骤：

脱蜡/补液

1. 脱蜡/水合切片：

2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。

3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。

4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。

5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。

6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾；在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。在工作台上冷却玻片 30 分钟。

染色

1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。

2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。

3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。

4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。

5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。

6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。

7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。

8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。在加湿室中室温孵育 30 分钟。

9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。

10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。

11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。

12. 将载玻片浸入 dH2O 中。

13. 如果需要，用苏木精复染切片。

14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。

15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒；在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒；在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。

16. 用盖玻片和封固剂封固切片。

Datasheet & SDS

生物描述

特异性
Anti-TSH Receptor/TSH-R Rabbit Antibody [L10M22] 可检测内源性 TSH Receptor/TSH-R 总蛋白水平。

蛋白定位
细胞膜，内膜系统

Uniprot ID
P16473

克隆号
L10M22

别名
LGR3, TSHR, Thyrotropin receptor, Thyroid-stimulating hormone receptor, TSH-R

背景
促甲状腺激素受体 (TSHR) 是甲状腺激素代谢的关键调节因子，也是甲状腺细胞功能和生长的主要控制者。它属于 G 蛋白偶联受体家族，具有七个跨膜结构域，位于甲状腺滤泡细胞的基底外侧膜上。TSHR 蛋白由 764 个氨基酸组成，分子量约为 87 kDa，通过与多种 G 蛋白亚型（最显著的是 Gαs 和 Gαq）相互作用来介导其效应。TSH 激活后，该受体通过这些 G 蛋白启动细胞内信号传导，从而调节下游效应分子的活性。Gαs 通路刺激环磷酸腺苷 (cAMP) 级联，而 Gαq 通路激活磷脂酶 C (PLC) 级联。TSH 浓度升高时，cAMP 与蛋白激酶 A (PKA) 结合，后者磷酸化各种靶效应分子，增强其催化活性。同时，PLC激活会产生肌醇1,4,5-三磷酸 (IP₃) 和二酰甘油 (DAG)，进一步增强细胞反应。TSHR的表达受生理性TSH水平的正向调控，但在TSH浓度持续升高时会下调。TSHR的慢性过度刺激，尤其是通过cAMP通路，可导致甲状腺激素分泌过多、甲状腺滤泡增生和临床甲状腺功能亢进。TSHR基因突变可能影响受体的蛋白质结构或其翻译后修饰，从而改变受体功能。虽然TSHR不会直接引发致癌作用，但当致癌基因已被激活时，它会显著促进肿瘤生长。

背景

促甲状腺激素受体 (TSHR) 是甲状腺激素代谢的关键调节因子，也是甲状腺细胞功能和生长的主要控制者。它属于 G 蛋白偶联受体家族，具有七个跨膜结构域，位于甲状腺滤泡细胞的基底外侧膜上。TSHR 蛋白由 764 个氨基酸组成，分子量约为 87 kDa，通过与多种 G 蛋白亚型（最显著的是 Gαs 和 Gαq）相互作用来介导其效应。TSH 激活后，该受体通过这些 G 蛋白启动细胞内信号传导，从而调节下游效应分子的活性。Gαs 通路刺激环磷酸腺苷 (cAMP) 级联，而 Gαq 通路激活磷脂酶 C (PLC) 级联。TSH 浓度升高时，cAMP 与蛋白激酶 A (PKA) 结合，后者磷酸化各种靶效应分子，增强其催化活性。同时，PLC激活会产生肌醇1,4,5-三磷酸 (IP₃) 和二酰甘油 (DAG)，进一步增强细胞反应。TSHR的表达受生理性TSH水平的正向调控，但在TSH浓度持续升高时会下调。TSHR的慢性过度刺激，尤其是通过cAMP通路，可导致甲状腺激素分泌过多、甲状腺滤泡增生和临床甲状腺功能亢进。TSHR基因突变可能影响受体的蛋白质结构或其翻译后修饰，从而改变受体功能。虽然TSHR不会直接引发致癌作用，但当致癌基因已被激活时，它会显著促进肿瘤生长。

参考文献
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28117293/

PVDF膜孔径规格选择参照表

Protein Size (kDa)	PVDF Transfer Membrane Pore Size (μm)
< 10	0.22
10-20	0.22
20-30	0.45
30-45	0.45
45-70	0.45
80-100	0.45
100-140	0.45
> 140	0.45

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* 必填项

Protein Size (kDa)	Separating Gel Percentage
4-40	20%
12-45	15%
10-70	12.5%
15-100	10%
25-100	8%
60-210	5%