D-Luciferin Potassium Salt

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D-Luciferin 是荧光素酶 (Luc) 的天然底物,对萤火虫产生典型的黄绿光进行催化。该反应产生的 560 nm 化学发光在几秒钟内达到峰值,当底物荧光素过量时,光输出与荧光素酶浓度成正比。荧光素酶 (luc) 基因是研究和活性分子筛选的常用报告基因。化学发光技术实际上是无背景的,使得 luc 报告基因成为检测低水平基因表达的理想选择。除了用于基因表达的外,荧光素酶还用于 ATP 的检测。

D-Luciferin Potassium Salt Chemical Structure

D-Luciferin Potassium Salt Chemical Structure

CAS: 115144-35-9

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生物活性

产品描述 D-Luciferin 是荧光素酶 (Luc) 的天然底物,对萤火虫产生典型的黄绿光进行催化。该反应产生的 560 nm 化学发光在几秒钟内达到峰值,当底物荧光素过量时,光输出与荧光素酶浓度成正比。荧光素酶 (luc) 基因是研究和活性分子筛选的常用报告基因。化学发光技术实际上是无背景的,使得 luc 报告基因成为检测低水平基因表达的理想选择。除了用于基因表达的外,荧光素酶还用于 ATP 的检测。
体外研究(In Vitro)
体外研究活性

1.体外生物发光图像测定实验方案示例
a) 在无菌水中制备 100 mM (100-200X) 萤光素储备溶液。 搅拌均匀。 立即使用,或一次性分装,-20℃保存,避免冻融循环,避光。
b) 在预热的组织培养基中制备 0.5-1 mM D-荧光素工作溶液。
c) 从培养的细胞中吸出培养基。
d) 向细胞中加入荧光素工作液,成像前37℃孵育细胞5-10分钟。
2.体内生物发光图像测定的示例方案
a) 在 DPBS 中制备 15 mg/mL 荧光素储备溶液,不含 Mg2+ 和 Ca2+。 搅拌均匀。
b) 通过0.2μm过滤器对溶液进行过滤除菌。 立即使用,或一次性分装,-20℃保存,避免冻融循环,避光。
c) 在成像前 10-15 分钟以动物体重的 150 mg/kg(或 10 μL/g 荧光素储备溶液)腹膜内 (i.p.) 注射荧光素。
注意:应对每种动物模型进行荧光素动力学研究,以确定峰值信号时间。
3.荧光素报告基因检测的示例方案
a) 在无菌水中制备 100 mM 荧光素储备溶液。 立即使用,或一次性分装,-20℃保存,避免冻融循环,避光。
b) 在 25 mM tricine 缓冲液 pH 7.8 中制备 1 mM D-荧光素工作溶液,其中含有 3 mM ATP、1 mM DTT 和 15 mM MgSO4。
c) 将 5-10 μL 细胞裂解液移入微孔板中。 使用不含裂解液的裂解试剂或缓冲液作为空白。
d) 用荧光素工作溶液灌注光度计。
e) 立即注入 200 μL 荧光素工作溶液,积分时间为 10 秒。

化学信息&溶解度

分子量 318.41 分子式

C11H7KN2O3S2

CAS号 115144-35-9 SDF --
Smiles C1C(N=C(S1)C2=NC3=C(S2)C=C(C=C3)O)C(=O)[O-].[K+]
储存条件(自收到货起) 3年 -20°C(避光) 粉状

体外溶解度
批次:

Water : 39 mg/mL (122.48 mM)

DMSO : 5 mg/mL ( (15.7 mM) ;DMSO吸湿会降低化合物溶解度,请使用新开封DMSO)

Ethanol : Insoluble

摩尔浓度计算器

体内溶解度
批次:

现配现用,请按从左到右的顺序依次添加,澄清后再加入下一溶剂

动物体内配方计算器

实验计算

摩尔浓度计算器

质量 浓度 体积 分子量

动物体内配方计算器(澄清溶液)

第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)

mg/kg g μL

第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶于水的药物;不同批次药物配方比例不同,请联系Selleck为您提供正确的澄清溶液配方)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

计算结果:

工作液浓度: mg/ml;

DMSO母液配制方法: mg 药物溶于μL DMSO溶液(母液浓度mg/mL,:如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请先联系Selleck);

体内配方配制方法:μL DMSO母液,加入μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入μL ddH2O,混匀澄清。

体内配方配制方法:μL DMSO母液,加入μL Corn oil,混匀澄清。

注意:1. 首先保证母液是澄清的;
2.一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。

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