hnRNP Q/R Rabbit mAb

目录号: F1365

    • Lane 1: SW620
      Lane 2: HCT116
    1/
    规格 价格 库存 购买数量
    20uL 790 现货
    50uL 1240 现货
    100uL 1990 现货
    100uL*2 3790 现货
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    操作要点

    WB
    蛋白定位
    细胞质; 内质网; 微粒体; 细胞核; 剪切小体
    建议使用 RIPA/NP-40 裂解。

    使用信息

    稀释比例
    1:1000
    1:50
    抗体应用
    WB, IP
    抗体类型
    Rabbit
    反应性
    Human, Mouse, Rat, Monkey
    储存液配方
    PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3
    储存条件(自收到货起)
    –20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years
    预测分子量
    65-82 kDa
    阳性对照 SW620; HCT 116
    阴性对照

    实验方法

    WB

    Western Blotting

     
    样品制备
    1. 吸去培养基,用1X PBS清洗细胞。
    2. 加入1X SDS上样缓冲液裂解细胞,将提取物转移至微量离心管中。置于冰上。
    3. 超声10–15秒,完成细胞裂解和DNA剪切。
    4. 将20 µl样品在95–100°C加热5分钟,然后置于冰上冷却。
    5. 离心5分钟(使用微量离心机)。
    6. 将适量样品上样至SDS-PAGE凝胶(上样量取决于提取蛋白浓度)。注意:同时请上样预染分子量标准,以确定分子量并验证电转效果。
    7. 电转至硝酸纤维素膜/PVDF膜(湿转法参考条件: 150mA 120min)。
     
    膜封闭与抗体孵育
    a. 封闭
    1. (可选)转膜完成后,用TBS室温洗膜5分钟。
    2. 将膜在封闭液中室温孵育1小时。
    3. 用TBST洗涤3次,每次5分钟。
     
    b. 抗体孵育
    1. 将膜与一抗(按推荐的稀释度和稀释液配制)置于一抗稀释缓冲液中,4°C温和摇床过夜孵育。
    2. 用TBST洗涤3次,每次5分钟。
    3. 将膜与适当的二抗(稀释于封闭液中)在室温下温和摇床孵育1小时。
    4. 用TBST洗涤3次,每次5分钟。
    5. 进行检测。
     
    显影检测
    1. 抗体孵育结束后,用TBST洗膜3次,每次5分钟。
    2. 配制ECL发光试剂(或根据二抗类型选择其他显色剂/底物)。混匀。
    3. 将底物与膜孵育1分钟,去除多余溶液(膜保持湿润),置于显影仪中进行曝光。

    Datasheet & SDS

    生物描述

    特异性

    hnRNP Q/R Rabbit mAb识别内源性hnRNP Q和hnRNP R总蛋白。

    Uniprot ID
    O43390, O60506
    克隆号
    N5J19
    背景

    异质核糖核糖蛋白 Q (hnRNP Q) 在 mRNA 代谢中发挥各种作用,包括剪接调控、编辑、稳定性、运输和翻译。hnRNP Q 参与细胞质 mRNA 运输与其与突触结合蛋白的相互作用以及其与驱动蛋白运动蛋白 KIF5 在 RNA 颗粒中的存在有关。 hnRNP R 与 hnRNP Q 相关,与存活运动神经元 (SMN) 蛋白共同将 β-肌动蛋白 mRNA 转运至轴突和生长锥,其消耗会损害轴突生长。鉴于 hnRNP Q 与 SMN 的相互作用,它可能还参与了神经元中的 mRNA 运输和局部翻译。hnRNP Q1 结合 Cdc42/N-WASP/Arp2/3 复合物的 mRNA 并与 Cdc42 mRNA 共定位,可能调节肌动蛋白动力学和神经元形态发生。

    参考文献

    技术支持

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