PITSLRE/CDK11 Rabbit mAb
目录号: F2651
-
Lane 1: Hela
Lane 2: 293
使用信息
| 稀释比例 |
|---|
|
| 抗体应用 |
|---|
| WB, IP |
| 抗体类型 |
|---|
| Rabbit |
| 反应性 |
|---|
| Human, Mouse, Monkey |
| 储存液配方 |
|---|
| PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3 |
| 储存条件(自收到货起) |
|---|
| –20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years |
| 预测分子量 |
|---|
| 110 kDa |
| 阳性对照 | HeLa; 293 |
|---|---|
| 阴性对照 |
实验方法
| WB |
|---|
Western Blotting
样品制备
1. 吸去培养基,用1X PBS清洗细胞。
2. 加入1X SDS上样缓冲液裂解细胞,将提取物转移至微量离心管中。置于冰上。
3. 超声10–15秒,完成细胞裂解和DNA剪切。
4. 将20 µl样品在95–100°C加热5分钟,然后置于冰上冷却。
5. 离心5分钟(使用微量离心机)。
6. 将适量样品上样至SDS-PAGE凝胶(上样量取决于提取蛋白浓度)。注意:同时请上样预染分子量标准,以确定分子量并验证电转效果。
7. 电转至硝酸纤维素膜/PVDF膜。(湿转法参考条件: 200mA 150min)
膜封闭与抗体孵育
a. 封闭
1. (可选)转膜完成后,用TBS室温洗膜5分钟。
2. 将膜在封闭液中室温孵育1小时。
3. 用TBST洗涤3次,每次5分钟。
b. 抗体孵育
1. 将膜与一抗(按推荐的稀释度和稀释液配制)置于一抗稀释缓冲液中,4°C温和摇床过夜孵育。
2. 用TBST洗涤3次,每次5分钟。
3. 将膜与适当的二抗(稀释于封闭液中)在室温下温和摇床孵育1小时。
4. 用TBST洗涤3次,每次5分钟。
5. 进行检测。
显影检测
1. 抗体孵育结束后,用TBST洗膜3次,每次5分钟。
2. 配制ECL发光试剂(或根据二抗类型选择其他显色剂/底物)。混匀。
3. 将底物与膜孵育1分钟,去除多余溶液(膜保持湿润),置于显影仪中进行曝光。
|
生物描述
| 特异性 |
|---|
PITSLRE/CDK11 Rabbit mAb 可检测内源性 PITSLRE/CDK11 总的蛋白水平。 |
| Uniprot ID |
|---|
| P21127 |
| 克隆号 |
|---|
| K17G19 |
| 背景 |
|---|
细胞周期蛋白依赖性激酶 PITSLRE，也称为 CDK11，是 p34cdc2 家族的成员，由两个基因 CDK11A 和 CDK11B 产生。 CDK11 最初被确定为细胞分裂的调控因子，此后已被证明在 RNA 剪接、细胞凋亡、姐妹染色单体凝聚和胞质分裂中发挥多种作用。最近的研究表明，CDK11 是自噬的关键调控因子，在营养丰富的条件下起着抑制作用。然而，CDK11 的长期缺失会导致未成熟的自噬中间体的积累并抑制自噬通量，这表明其在包括果蝇和人类在内的不同物种的自噬中的作用是保守的。 |
| 参考文献 |
|---|
技术支持
在订购、运输、储存和使用我们的产品的任何阶段，您遇到的任何问题，均可以通过拨打我们的热线电话400-668-6834，或者技术支持邮箱tech@selleck.cn，直接联系到我们。我们会在24小时内尽快联系您。
* 必填项
