Presenilin 2 Rabbit mAb
目录号: F1375
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Lane 1: HeLa
Lane 2: HepG2
Lane 3: C2C12
Lane 4: C6
操作要点
WB
蛋白定位
内质网; 高尔基体; 内膜
建议使用 RIPA/NP-40 裂解。
使用信息
| 稀释比例 |
|---|
|
| 抗体应用 |
|---|
| WB, IP |
| 抗体类型 |
|---|
| Rabbit |
| 反应性 |
|---|
| Human, Mouse, Rat |
| 储存液配方 |
|---|
| PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3 |
| 储存条件(自收到货起) |
|---|
| –20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years |
| 预测分子量 |
|---|
| 23 (CTF)kDa |
| 阳性对照 | MEF (Presenilin1-treated) |
|---|---|
| 阴性对照 |
样品处理数据示例
| 样品 | 处理情况 | ||||
| MEF | Presenilin1 treatment | ||||
| 点击查看更多样品数据 | |||||
*该蛋白在不同的人源细胞、组织内的表达量预测请参考：http://www.proteinatlas.org
实验方法
| WB |
|---|
Western Blotting 样品制备
1. 吸去培养基,用1X PBS清洗细胞。
2. 加入1X SDS上样缓冲液裂解细胞,将提取物转移至微量离心管中。置于冰上。
3. 超声10–15秒,完成细胞裂解和DNA剪切。
4. 将20 µl样品在95–100°C加热5分钟,然后置于冰上冷却。
5. 离心5分钟(使用微量离心机)。
6. 将适量样品上样至SDS-PAGE凝胶(上样量取决于提取蛋白浓度)。注意:同时请上样预染分子量标准,以确定分子量并验证电转效果。
7. 电转至硝酸纤维素膜/PVDF膜(湿转法参考条件: 150mA 70min)。
膜封闭与抗体孵育
a. 封闭
1. (可选)转膜完成后,用TBS室温洗膜5分钟。
2. 将膜在封闭液中室温孵育1小时。
3. 用TBST洗涤3次,每次5分钟。
b. 抗体孵育
1. 将膜与一抗(按推荐的稀释度和稀释液配制)置于一抗稀释缓冲液中,4°C温和摇床过夜孵育。
2. 用TBST洗涤3次,每次5分钟。
3. 将膜与适当的二抗(稀释于封闭液中)在室温下温和摇床孵育1小时。
4. 用TBST洗涤3次,每次5分钟。
5. 进行检测。
显影检测
1. 抗体孵育结束后,用TBST洗膜3次,每次5分钟。
2. 配制ECL发光试剂(或根据二抗类型选择其他显色剂/底物)。混匀。
3. 将底物与膜孵育1分钟,去除多余溶液(膜保持湿润),置于显影仪中进行曝光。 |
生物描述
| 特异性 |
|---|
Presenilin 2 Rabbit mAb识别内源性早老素2蛋白水平。 |
| 别名 |
|---|
| Presenilin 2,AD5 |
| Uniprot ID |
|---|
| P49810 |
| 克隆号 |
|---|
| P6E5 |
| 背景 |
|---|
早老素 2 (PSEN2) 是一种跨膜蛋白，是 γ-分泌酶膜内蛋白酶复合物的组成部分，该复合物处理各种整合膜蛋白并参与多种信号传导途径。PSEN2 最初被报道为阿尔茨海默病的致病基因，位于染色体 1q42.13 上，包含 12 个外显子，外显子 1 和外显子 2 中有非翻译区。该基因有两个启动子元件 P1 和 P2，驱动其表达，并产生两种异构体。同工型 1 存在于胎盘、骨骼肌和心脏中，而同工型 2 缺少氨基酸 263-296，存在于大脑、心脏、胎盘、肝脏、骨骼肌和肾脏中。在神经元中，早老素蛋白定位于内质网和高尔基体。PSEN2 参与调控细胞凋亡和葡萄糖代谢，能引起胰岛素水平降低。 |
| 参考文献 |
|---|
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