Anti-Collagen IV Mouse Antibody [E5G18]

目录号: F1667

抗体应用：反应性：Human

Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human placenta tissue with F1667 at 1:125 dilution.,
Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human placenta tissue with F1667 at 1:125 dilution.,

规格	价格	库存
20uL	790	现货
50uL	1240	现货
100uL	1990	现货
100uL*2	3790	现货
400-668-6834 info@selleck.cn

使用信息

稀释比例
IHC1:100-1:250

抗体应用
IHC

反应性
Human

抗体类型
Mouse

储存液配方
PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3

储存条件(自收到货起)
-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

阳性对照	Human ovary; Human tongue
阴性对照

实验方法

IHC
实验步骤：脱蜡/补液 1. 脱蜡/水合切片： 2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。 3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。 4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。 5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。 6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾；在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。在工作台上冷却玻片 30 分钟。染色 1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。 2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。 3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。 4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。 5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。 6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。 7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。 8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。在加湿室中室温孵育 30 分钟。 9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。 10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。 11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。 12. 将载玻片浸入 dH2O 中。 13. 如果需要，用苏木精复染切片。 14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。 15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒；在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒；在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。 16. 用盖玻片和封固剂封固切片。

IHC

实验步骤：

脱蜡/补液

1. 脱蜡/水合切片：

2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。

3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。

4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。

5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。

6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾；在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。在工作台上冷却玻片 30 分钟。

染色

1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。

2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。

3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。

4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。

5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。

6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。

7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。

8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。在加湿室中室温孵育 30 分钟。

9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。

10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。

11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。

12. 将载玻片浸入 dH2O 中。

13. 如果需要，用苏木精复染切片。

14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。

15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒；在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒；在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。

16. 用盖玻片和封固剂封固切片。

Datasheet & SDS

生物描述

特异性
Anti-Collagen IV Mouse Antibody [E5G18] 可检测内源性 Collagen IV 总蛋白水平。

蛋白定位
基底膜，细胞外基质，细胞外环境

Uniprot ID
P02462

克隆号
E5G18

别名
Collagen alpha-1(IV) chain, COL4A1

背景
IV型胶原蛋白是基底膜的主要结构胶原蛋白，基底膜是一种特殊的细胞外基质，提供机械支撑、调节细胞黏附并组织其他基质成分。IV型胶原蛋白是一种异三聚体，由六条α链（α1-α6）组合而成，这些α链由不同的基因编码，在大多数组织中通常排列为两条α1链和一条α2链，在细胞内组装成三螺旋原体。这些原体通过其NC1和7S结构域分泌并交联，形成稳定的片状网络，连接层粘连蛋白、蛋白聚糖和生长因子。IV型胶原蛋白广泛表达于上皮细胞和内皮细胞的基底膜，具有组织特异性的亚型组成，并在发育、组织完整性、细胞迁移以及通过整合素（例如α1β1和α2β1）的信号传导中发挥重要作用。胶原蛋白 IV 的缺陷或异常交联会导致多种病症，包括阿尔波特综合征、古德帕斯彻病、糖尿病肾病和某些皮肤病。

背景

IV型胶原蛋白是基底膜的主要结构胶原蛋白，基底膜是一种特殊的细胞外基质，提供机械支撑、调节细胞黏附并组织其他基质成分。IV型胶原蛋白是一种异三聚体，由六条α链（α1-α6）组合而成，这些α链由不同的基因编码，在大多数组织中通常排列为两条α1链和一条α2链，在细胞内组装成三螺旋原体。这些原体通过其NC1和7S结构域分泌并交联，形成稳定的片状网络，连接层粘连蛋白、蛋白聚糖和生长因子。IV型胶原蛋白广泛表达于上皮细胞和内皮细胞的基底膜，具有组织特异性的亚型组成，并在发育、组织完整性、细胞迁移以及通过整合素（例如α1β1和α2β1）的信号传导中发挥重要作用。胶原蛋白 IV 的缺陷或异常交联会导致多种病症，包括阿尔波特综合征、古德帕斯彻病、糖尿病肾病和某些皮肤病。

参考文献
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29310777/

PVDF膜孔径规格选择参照表

Protein Size (kDa)	PVDF Transfer Membrane Pore Size (μm)
< 10	0.22
10-20	0.22
20-30	0.45
30-45	0.45
45-70	0.45
80-100	0.45
100-140	0.45
> 140	0.45

技术支持

在订购、运输、储存和使用我们的产品的任何阶段，您遇到的任何问题，均可以通过拨打我们的热线电话400-668-6834，或者技术支持邮箱tech@selleck.cn，直接联系到我们。我们会在24小时内尽快联系您。

* 必填项

Protein Size (kDa)	Separating Gel Percentage
4-40	20%
12-45	15%
10-70	12.5%
15-100	10%
25-100	8%
60-210	5%