Anti-Collagen VII Mouse Antibody [K3G14]

目录号: F3214

抗体应用：反应性：Human

Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human tonsils tissue with F3214 at 1:500 dilution.,
Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human tonsils tissue with F3214 at 1:500 dilution.,

规格	价格	库存
20uL	790	现货
50uL	1240	现货
100uL	1990	现货
100uL*2	3790	现货
400-668-6834 info@selleck.cn

使用信息

稀释比例
IHC1:300 - 1:600

抗体应用
IHC-Fr

反应性
Human

抗体类型
Mouse

储存液配方
PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3

储存条件(自收到货起)
-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

阳性对照	Human tonsil
阴性对照

实验方法

IHC
实验步骤：脱蜡/补液 1. 脱蜡/水合切片： 2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。 3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。 4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。 5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。 6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾；在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。在工作台上冷却玻片 30 分钟。染色 1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。 2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。 3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。 4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。 5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。 6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。 7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。 8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。在加湿室中室温孵育 30 分钟。 9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。 10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。 11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。 12. 将载玻片浸入 dH2O 中。 13. 如果需要，用苏木精复染切片。 14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。 15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒；在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒；在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。 16. 用盖玻片和封固剂封固切片。

IHC

实验步骤：

脱蜡/补液

1. 脱蜡/水合切片：

2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。

3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。

4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。

5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。

6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾；在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。在工作台上冷却玻片 30 分钟。

染色

1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。

2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。

3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。

4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。

5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。

6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。

7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。

8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。在加湿室中室温孵育 30 分钟。

9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。

10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。

11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。

12. 将载玻片浸入 dH2O 中。

13. 如果需要，用苏木精复染切片。

14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。

15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒；在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒；在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。

16. 用盖玻片和封固剂封固切片。

Datasheet & SDS

生物描述

特异性
Anti-Collagen VII Mouse Antibody [K3G14] 可检测内源性 Collagen VII 总蛋白水平。

蛋白定位
基底膜，细胞外基质，细胞外环境

Uniprot ID
Q02388

克隆号
K3G14

别名
Collagen alpha-1(VII) chain, Long-chain collagen, LC collagen, COL7A1

背景
VII型胶原蛋白是一种特殊的纤维状胶原蛋白，主要负责形成锚定纤维，从而稳定皮肤中的真皮-表皮连接。它由COL7A1基因编码，主要在表皮角质形成细胞和真皮成纤维细胞中表达。VII型胶原蛋白的结构为同型三聚体，由三条α1-前体(VII)链组成，每条链都有一个中心三螺旋结构域（约1,530个氨基酸），中间有19个缺陷，包括一个蛋白酶敏感的39个氨基酸的“铰链”区。该中心结构域两侧是两个非胶原结构域：位于N末端的NC-1，包含粘附模块，例如纤连蛋白III型重复序列和一个血管性血友病因子A结构域；以及位于C末端的NC-2，包含一个类似库尼茨蛋白酶抑制剂的片段。两个胶原蛋白VII分子组装成反向平行的二聚体，由二硫键稳定，并进一步聚集成锚定原纤维。功能上，胶原蛋白VII通过与基底膜成分（例如层粘连蛋白-332和胶原蛋白IV）高亲和力结合，将基底膜锚定到真皮层下层，从而维持皮肤完整性；其突变会导致营养不良性大疱性表皮松解症(DEB)，这是一种严重的水疱性皮肤病。

背景

VII型胶原蛋白是一种特殊的纤维状胶原蛋白，主要负责形成锚定纤维，从而稳定皮肤中的真皮-表皮连接。它由COL7A1基因编码，主要在表皮角质形成细胞和真皮成纤维细胞中表达。VII型胶原蛋白的结构为同型三聚体，由三条α1-前体(VII)链组成，每条链都有一个中心三螺旋结构域（约1,530个氨基酸），中间有19个缺陷，包括一个蛋白酶敏感的39个氨基酸的“铰链”区。该中心结构域两侧是两个非胶原结构域：位于N末端的NC-1，包含粘附模块，例如纤连蛋白III型重复序列和一个血管性血友病因子A结构域；以及位于C末端的NC-2，包含一个类似库尼茨蛋白酶抑制剂的片段。两个胶原蛋白VII分子组装成反向平行的二聚体，由二硫键稳定，并进一步聚集成锚定原纤维。功能上，胶原蛋白VII通过与基底膜成分（例如层粘连蛋白-332和胶原蛋白IV）高亲和力结合，将基底膜锚定到真皮层下层，从而维持皮肤完整性；其突变会导致营养不良性大疱性表皮松解症(DEB)，这是一种严重的水疱性皮肤病。

参考文献
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19945621/

PVDF膜孔径规格选择参照表

Protein Size (kDa)	PVDF Transfer Membrane Pore Size (μm)
< 10	0.22
10-20	0.22
20-30	0.45
30-45	0.45
45-70	0.45
80-100	0.45
100-140	0.45
> 140	0.45

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* 必填项

Protein Size (kDa)	Separating Gel Percentage
4-40	20%
12-45	15%
10-70	12.5%
15-100	10%
25-100	8%
60-210	5%