Anti-Endothelial Cell Mouse Antibody [K23P8]

目录号: F1713

抗体应用：反应性：Rat

Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded rat brain tissue with F1713 at 1:200 dilution.,
Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded rat brain tissue with F1713 at 1:200 dilution.,

规格	价格	库存
20uL	790	现货
50uL	1240	现货
100uL	1990	现货
100uL*2	3790	现货
400-668-6834 info@selleck.cn

使用信息

稀释比例
IHC1:100

抗体应用
IHC

反应性
Rat

抗体类型
Mouse

储存液配方
PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3

储存条件(自收到货起)
-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

阳性对照	Rat brain
阴性对照

实验方法

IHC
实验步骤：脱蜡/补液 1. 脱蜡/水合切片： 2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。 3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。 4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。 5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。 6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾；在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。在工作台上冷却玻片 30 分钟。染色 1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。 2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。 3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。 4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。 5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。 6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。 7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。 8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。在加湿室中室温孵育 30 分钟。 9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。 10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。 11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。 12. 将载玻片浸入 dH2O 中。 13. 如果需要，用苏木精复染切片。 14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。 15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒；在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒；在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。 16. 用盖玻片和封固剂封固切片。

IHC

实验步骤：

脱蜡/补液

1. 脱蜡/水合切片：

2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。

3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。

4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。

5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。

6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾；在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。在工作台上冷却玻片 30 分钟。

染色

1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。

2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。

3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。

4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。

5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。

6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。

7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。

8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。在加湿室中室温孵育 30 分钟。

9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。

10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。

11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。

12. 将载玻片浸入 dH2O 中。

13. 如果需要，用苏木精复染切片。

14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。

15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒；在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒；在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。

16. 用盖玻片和封固剂封固切片。

Datasheet & SDS

生物描述

特异性
Anti-Endothelial Cell Mouse Antibody [K23P8] 可检测内源性 Endothelial Cell 总蛋白水平。

克隆号
K23P8

背景
内皮细胞形成单层薄细胞膜，覆盖血管和淋巴管的内表面，是循环液体与周围组织之间的关键屏障。它们通过紧密连接连接并锚定于基底膜，并具有维持血管完整性和介导免疫细胞相互作用的特殊表面蛋白，例如血管内皮细胞钙粘蛋白和血小板粘附分子-1 (PECAM-1)。它们通过释放血管扩张剂（如一氧化氮）和血管收缩剂（如内皮素）来调节血管张力，通过平衡促凝和抗凝因子来维持止血，并控制液体在血管壁上的过滤。它们通过增殖和迁移形成新的毛细血管，在血管生成中发挥重要作用，而这些新的毛细血管对伤口愈合、生殖和肿瘤生长至关重要。内皮细胞还通过表达选择素和整合素来调节免疫监视，促进炎症期间白细胞的滚动、粘附和迁移。内皮细胞功能障碍会导致动脉粥样硬化、高血压、糖尿病相关血管并发症以及慢性炎症等疾病。在肿瘤中，异常内皮细胞会形成不规则、脆弱的血管，缺乏平滑肌和周细胞覆盖，从而促进癌症进展和转移。内皮细胞功能障碍会使其表型从抗凝和抗炎转变为促血栓和促炎，从而推动血管疾病进展。

背景

内皮细胞形成单层薄细胞膜，覆盖血管和淋巴管的内表面，是循环液体与周围组织之间的关键屏障。它们通过紧密连接连接并锚定于基底膜，并具有维持血管完整性和介导免疫细胞相互作用的特殊表面蛋白，例如血管内皮细胞钙粘蛋白和血小板粘附分子-1 (PECAM-1)。它们通过释放血管扩张剂（如一氧化氮）和血管收缩剂（如内皮素）来调节血管张力，通过平衡促凝和抗凝因子来维持止血，并控制液体在血管壁上的过滤。它们通过增殖和迁移形成新的毛细血管，在血管生成中发挥重要作用，而这些新的毛细血管对伤口愈合、生殖和肿瘤生长至关重要。内皮细胞还通过表达选择素和整合素来调节免疫监视，促进炎症期间白细胞的滚动、粘附和迁移。内皮细胞功能障碍会导致动脉粥样硬化、高血压、糖尿病相关血管并发症以及慢性炎症等疾病。在肿瘤中，异常内皮细胞会形成不规则、脆弱的血管，缺乏平滑肌和周细胞覆盖，从而促进癌症进展和转移。内皮细胞功能障碍会使其表型从抗凝和抗炎转变为促血栓和促炎，从而推动血管疾病进展。

参考文献
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12891700/ https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37827214/

PVDF膜孔径规格选择参照表

Protein Size (kDa)	PVDF Transfer Membrane Pore Size (μm)
< 10	0.22
10-20	0.22
20-30	0.45
30-45	0.45
45-70	0.45
80-100	0.45
100-140	0.45
> 140	0.45

技术支持

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* 必填项

Protein Size (kDa)	Separating Gel Percentage
4-40	20%
12-45	15%
10-70	12.5%
15-100	10%
25-100	8%
60-210	5%