Anti-NCX1 Mouse Antibody [C23J23]

目录号: F2381

抗体应用：反应性：Human

Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human gastric cancer tissue with F2381 at 1:1000 dilution.,
Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human gastric cancer tissue with F2381 at 1:1000 dilution.,

规格	价格	库存
20uL	790	现货
50uL	1240	现货
100uL	1990	现货
100uL*2	3790	现货
400-668-6834 info@selleck.cn

使用信息

稀释比例
IHC1:200 FCM1:20 - 1:100

抗体应用
IHC, FCM

反应性
Human

抗体类型
Mouse

储存液配方
PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3

储存条件(自收到货起)
-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

阳性对照	Human kidney; HEK293
阴性对照

实验方法

IHC
实验步骤：脱蜡/补液 1. 脱蜡/水合切片： 2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。 3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。 4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。 5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。 6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾；在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。在工作台上冷却玻片 30 分钟。染色 1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。 2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。 3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。 4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。 5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。 6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。 7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。 8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。在加湿室中室温孵育 30 分钟。 9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。 10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。 11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。 12. 将载玻片浸入 dH2O 中。 13. 如果需要，用苏木精复染切片。 14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。 15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒；在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒；在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。 16. 用盖玻片和封固剂封固切片。

IHC

实验步骤：

脱蜡/补液

1. 脱蜡/水合切片：

2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。

3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。

4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。

5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。

6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾；在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。在工作台上冷却玻片 30 分钟。

染色

1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。

2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。

3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。

4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。

5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。

6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。

7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。

8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。在加湿室中室温孵育 30 分钟。

9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。

10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。

11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。

12. 将载玻片浸入 dH2O 中。

13. 如果需要，用苏木精复染切片。

14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。

15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒；在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒；在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。

16. 用盖玻片和封固剂封固切片。

Datasheet & SDS

生物描述

特异性
Anti-NCX1 Mouse Antibody [C23J23] 可检测内源性 NCX1 总蛋白水平。

蛋白定位
细胞膜，内膜系统

Uniprot ID
P32418

克隆号
C23J23

别名
CNC, NCX1, SLC8A1, Sodium/calcium exchanger 1, Na(+)/Ca(2+)-exchange protein 1, Solute carrier family 8 member 1

背景
NCX1（钠钙交换蛋白1）是一种广泛表达的膜蛋白，对细胞内Ca²⁺稳态至关重要，尤其是在心脏和大脑中。NCX1负责将细胞内的Ca²⁺与细胞外的Na⁺交换，从而调节兴奋-收缩偶联和神经元信号传导。NCX1的结构包含九个跨膜片段，其中两个α重复序列区域（参与离子结合和转运）以及一个位于TMS 5–6之间的大型胞内环，该环包含与调节性Ca²⁺结合的β重复序列区域。NCX1存在多种剪接变体，且具有组织特异性的调控表型，其中NCX1.1是主要的心脏亚型。 NCX1的功能受局部因素、离子浓度、脂质以及由PKA和PKC等激酶在包含mAKAP、磷酸酶（PP1、PP2A）和其他调节蛋白的大分子复合物内进行的磷酸化调控。在心肌细胞中，这种组织能够实现精确的β-肾上腺素能调节，但在心力衰竭中会出现过度磷酸化和反应性减弱等改变，这凸显了其在生理和病理状态下的重要性。

背景

NCX1（钠钙交换蛋白1）是一种广泛表达的膜蛋白，对细胞内Ca²⁺稳态至关重要，尤其是在心脏和大脑中。NCX1负责将细胞内的Ca²⁺与细胞外的Na⁺交换，从而调节兴奋-收缩偶联和神经元信号传导。NCX1的结构包含九个跨膜片段，其中两个α重复序列区域（参与离子结合和转运）以及一个位于TMS 5–6之间的大型胞内环，该环包含与调节性Ca²⁺结合的β重复序列区域。NCX1存在多种剪接变体，且具有组织特异性的调控表型，其中NCX1.1是主要的心脏亚型。 NCX1的功能受局部因素、离子浓度、脂质以及由PKA和PKC等激酶在包含mAKAP、磷酸酶（PP1、PP2A）和其他调节蛋白的大分子复合物内进行的磷酸化调控。在心肌细胞中，这种组织能够实现精确的β-肾上腺素能调节，但在心力衰竭中会出现过度磷酸化和反应性减弱等改变，这凸显了其在生理和病理状态下的重要性。

参考文献
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12754202/ https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17303833/

PVDF膜孔径规格选择参照表

Protein Size (kDa)	PVDF Transfer Membrane Pore Size (μm)
< 10	0.22
10-20	0.22
20-30	0.45
30-45	0.45
45-70	0.45
80-100	0.45
100-140	0.45
> 140	0.45

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* 必填项

Protein Size (kDa)	Separating Gel Percentage
4-40	20%
12-45	15%
10-70	12.5%
15-100	10%
25-100	8%
60-210	5%