Anti-S100A9 + Calprotectin (S100A8/A9 complex) Mouse Antibody [P14P6]

目录号: F1711

抗体应用：反应性：Human

Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human tonsils tissue with F1711 at 1:1000 dilution.,
Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human tonsils tissue with F1711 at 1:1000 dilution.,

规格	价格	库存
20uL	790	现货
50uL	1240	现货
100uL	1990	现货
100uL*2	3790	现货
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使用信息

稀释比例
IHC1:1000

抗体应用
IHC

反应性
Human

抗体类型
Mouse

储存液配方
PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3

储存条件(自收到货起)
-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

阳性对照	Human spleen, Human Hodgkins lymphoma
阴性对照

实验方法

IHC
实验步骤：脱蜡/补液 1. 脱蜡/水合切片： 2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。 3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。 4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。 5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。 6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾；在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。在工作台上冷却玻片 30 分钟。染色 1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。 2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。 3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。 4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。 5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。 6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。 7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。 8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。在加湿室中室温孵育 30 分钟。 9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。 10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。 11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。 12. 将载玻片浸入 dH2O 中。 13. 如果需要，用苏木精复染切片。 14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。 15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒；在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒；在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。 16. 用盖玻片和封固剂封固切片。

IHC

实验步骤：

脱蜡/补液

1. 脱蜡/水合切片：

2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。

3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。

4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。

5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。

6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾；在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。在工作台上冷却玻片 30 分钟。

染色

1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。

2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。

3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。

4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。

5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。

6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。

7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。

8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。在加湿室中室温孵育 30 分钟。

9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。

10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。

11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。

12. 将载玻片浸入 dH2O 中。

13. 如果需要，用苏木精复染切片。

14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。

15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒；在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒；在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。

16. 用盖玻片和封固剂封固切片。

Datasheet & SDS

生物描述

特异性
Anti-S100A9 + Calprotectin (S100A8/A9 complex) Mouse Antibody [P14P6] 可检测内源性 S100A9 + Calprotectin (S100A8/A9 complex) 总蛋白水平。

蛋白定位
细胞膜，细胞质，细胞骨架，内膜系统，细胞外环境

Uniprot ID
P06702

克隆号
P14P6

别名
CAGB, CFAG, MRP14, S100A9, Protein S100-A9, Calgranulin-B, Calprotectin L1H subunit, Leukocyte L1 complex heavy chain, Migration inhibitory factor-related protein 14, S100 calcium-binding protein A9, MRP-14, p14

背景
S100A9 + 钙卫蛋白（S100A8/A9复合物）又称髓系相关蛋白MRP8/MRP14，是由S100A8和S100A9组成的Ca²⁺结合异二聚体复合物，两者均属于S100蛋白家族。该复合物主要表达于中性粒细胞、单核细胞和其他免疫细胞中，在炎症和应激条件下会诱导表达。结构上，每个亚基包含两个EF-hand Ca²⁺结合结构域（低亲和力的N端和高亲和力的C端），它们通过铰链区连接，形成稳定的异二聚体或功能性四聚体。功能上，S100A8/A9通过调节白细胞趋化性、吞噬细胞迁移、微管聚合、活性氧产生和细胞因子释放，在先天免疫和炎症中发挥多种作用。它还能与TLR4和RAGE等受体结合，激活下游信号通路，例如MAPK、PI3K/Akt、NF-κB和mTOR。在癌症中，S100A8/A9调节肿瘤的生长、转移、凋亡、耐药性和预后，使其成为一种极具潜力的生物标志物和治疗靶点。

背景

S100A9 + 钙卫蛋白（S100A8/A9复合物）又称髓系相关蛋白MRP8/MRP14，是由S100A8和S100A9组成的Ca²⁺结合异二聚体复合物，两者均属于S100蛋白家族。该复合物主要表达于中性粒细胞、单核细胞和其他免疫细胞中，在炎症和应激条件下会诱导表达。结构上，每个亚基包含两个EF-hand Ca²⁺结合结构域（低亲和力的N端和高亲和力的C端），它们通过铰链区连接，形成稳定的异二聚体或功能性四聚体。功能上，S100A8/A9通过调节白细胞趋化性、吞噬细胞迁移、微管聚合、活性氧产生和细胞因子释放，在先天免疫和炎症中发挥多种作用。它还能与TLR4和RAGE等受体结合，激活下游信号通路，例如MAPK、PI3K/Akt、NF-κB和mTOR。在癌症中，S100A8/A9调节肿瘤的生长、转移、凋亡、耐药性和预后，使其成为一种极具潜力的生物标志物和治疗靶点。

参考文献
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37701037/

PVDF膜孔径规格选择参照表

Protein Size (kDa)	PVDF Transfer Membrane Pore Size (μm)
< 10	0.22
10-20	0.22
20-30	0.45
30-45	0.45
45-70	0.45
80-100	0.45
100-140	0.45
> 140	0.45

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* 必填项

Protein Size (kDa)	Separating Gel Percentage
4-40	20%
12-45	15%
10-70	12.5%
15-100	10%
25-100	8%
60-210	5%