CFSE

别名: Carboxyfluorescein succinimidyl ester, 5(6)-Carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester, CFDA-SE, 5(6)-CFDA N-succinmidyl ester

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Carboxyfluorescein succinimidyl ester (CFSE, 5(6)-Carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester, CFDA-SE, 5(6)-CFDA N-succinmidyl ester)是一种荧光细胞染料。CFSE常用于检测细胞增殖和迁移。CFSE具有细胞可透过性,通过其琥珀酰亚胺基团,与细胞内赖氨酸残基及其他胺来源共价结合。

CFSE Chemical Structure

CFSE Chemical Structure

CAS: 150347-59-4

规格 价格 库存 购买数量
10mM (1mL in DMSO) 958.23 现货
10mg 795.2 现货
50mg 3251.94 现货
200mg 8166.15 现货
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生物活性

产品描述 Carboxyfluorescein succinimidyl ester (CFSE, 5(6)-Carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester, CFDA-SE, 5(6)-CFDA N-succinmidyl ester)是一种荧光细胞染料。CFSE常用于检测细胞增殖和迁移。CFSE具有细胞可透过性,通过其琥珀酰亚胺基团,与细胞内赖氨酸残基及其他胺来源共价结合。
体外研究(In Vitro)
体外研究活性

CFSE工作液的制备
1.1 原液的制备
将 1 mg CFSE 溶解在 0.1794 mL DMSO 中,以获得 10 mM CFSE。
注意:建议将储备液保存在-20℃或-80℃避光条件下,并避免反复冻融。
1.2 CFSE工作液的配制
用无血清细胞培养基或 PBS 稀释储备液,得到 5-10 μM 的 CFSE 工作液。
注:请根据实际情况调整CFSE工作液浓度。
细胞染色
2.1 对于悬浮细胞:4℃、1000g离心3-5分钟,弃上清。 用PBS清洗两次,每次5分钟。
对于贴壁细胞:弃去细胞培养基,加入胰蛋白酶解离细胞,制成单细胞悬液。 4℃ 1000 g 离心 3-5 分钟,弃上清。 用PBS清洗两次,每次5分钟。
2.2 加入1 mL CFSE工作液,室温孵育30分钟。
2.3 400 g、4℃离心3-4分钟,弃上清。
2.4 用PBS洗涤两次,每次5分钟。
2.5 用无血清细胞培养基或PBS重悬细胞,然后用荧光显微镜或流式细胞仪检测。

细胞实验 细胞系 人类红白血病细胞系K562, 小鼠淋巴瘤细胞株YAC-1, 人类乳腺癌细胞系MCF-7和人类黑色素瘤细胞系A375
浓度 2 µM, 3 µM, 4 µM, 5 µM, 10 µM和20 µM
孵育时间 5, 6, 7, 8, 10 和 15分钟
方法

将储存于DMSO中的5 mM CFDA-SE用PBS稀释至不同的浓度(2 µM, 3 µM, 4 µM, 5 µM, 10 µM和20 µM),其总体积为1 mL。收集细胞系,用PBS洗涤细胞三次。向细胞中加入不同浓度的CFDA-SE,在37℃培养5, 6, 7, 8, 10和15分钟(置于摇床)。通过加入等体积的热失活胎牛血清1 min以终止标记反应。用PBS冲洗CFDA-SE标记的细胞两次,重新计数。

体内研究(In Vivo)
体内研究活性

体内实验中,用CFSE标记细胞是可行的,并且对标记细胞及邻近细胞几乎没有毒性。通过外周淋巴器官的T细胞恢复证明,CFSE在相对长期的迁移实验中具有一定优势[2]

动物实验 Animal Models C57Bl/6小鼠
Dosages 10 μM
Administration 注射到胸腺叶中
NCT Number Recruitment Conditions Sponsor/Collaborators Start Date Phases
NCT02028403 Completed
HIV Infections
National Institute of Allergy and Infectious Diseases (NIAID)
June 2014 Phase 1
NCT01376726 Completed
HIV Infections
National Institute of Allergy and Infectious Diseases (NIAID)|Novartis Vaccines and Diagnostics Inc
July 2011 Phase 1
NCT01029548 Completed
HIV Infections
Barbara Ensoli MD|Istituto Superiore di Sanità
April 2008 --
NCT01024556 Completed
HIV Infection
Barbara Ensoli MD|Istituto Superiore di Sanità
March 2008 --

化学信息&溶解度

分子量 557.46 分子式

C29H19NO11

CAS号 150347-59-4 SDF Download CFSE SDF
Smiles CC(=O)OC1=CC=C2C(=C1)OC3=C(C=CC(=C3)OC(C)=O)C24OC(=O)C5=CC(=CC=C45)C(=O)ON6C(=O)CCC6=O.CC(=O)OC7=CC=C8C(=C7)OC9=C(C=CC(=C9)OC(C)=O)C8%10OC(=O)C%11=CC=C(C=C%10%11)C(=O)ON%12C(=O)CCC%12=O
储存条件(自收到货起) 3年 -20°C(避光) 粉状

体外溶解度
批次:

DMSO : 100 mg/mL ( (179.38 mM) ;DMSO吸湿会降低化合物溶解度,请使用新开封DMSO)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

摩尔浓度计算器

体内溶解度
批次:

现配现用,请按从左到右的顺序依次添加,澄清后再加入下一溶剂

动物体内配方计算器

实验计算

摩尔浓度计算器

质量 浓度 体积 分子量

动物体内配方计算器(澄清溶液)

第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)

mg/kg g μL

第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶于水的药物;不同批次药物配方比例不同,请联系Selleck为您提供正确的澄清溶液配方)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

计算结果:

工作液浓度: mg/ml;

DMSO母液配制方法: mg 药物溶于μL DMSO溶液(母液浓度mg/mL,:如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请先联系Selleck);

体内配方配制方法:μL DMSO母液,加入μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入μL ddH2O,混匀澄清。

体内配方配制方法:μL DMSO母液,加入μL Corn oil,混匀澄清。

注意:1. 首先保证母液是澄清的;
2.一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。

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