RI-1
别名: RAD51 inhibitor 1
RI-1 (RAD51 inhibitor 1)是RAD51抑制剂，IC50为5至30 µM。
RI-1 Chemical Structure
CAS: 415713-60-9
产品质控
生物活性
| 产品描述 | RI-1 (RAD51 inhibitor 1)是RAD51抑制剂，IC50为5至30 µM。 | ||
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| 靶点 |
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| 体外研究(In Vitro) | ||||
| 体外研究活性 | RI-1通过直接和特异破坏HsRAD51和抑制RAD51，形成对单链DNA细丝的能力，提高细胞对DNA损伤的敏感性。此外，在所有三种癌细胞株（HeLa细胞，MCF-7和U2OS）中，RI-1单独产生单剂毒性，LD50值在20-40微米范围内。[1] RI-1减少了在G2期细胞的γ-H2AX灶，并导致在辐射6小时后未修复DNA双链断裂的升高。[2] | |||
|---|---|---|---|---|
| 激酶实验 | DNA结合检测 | |||
| 所有反应均在黑色非结合性聚苯乙烯384孔板中进行，反应体积为30-100微升。纯化的DNA链交换的蛋白质和化学化合物预先在室温下孵育5分钟；然后进一步在37 ℃下孵育30分钟，使用100nM的单链DNA底物，它由在5'末端Alexa 488标签的45 -聚体的多-dT（合成并通过综合的DNA技术进行纯化）组成。反应在20 mM HEPES （pH值7.5）， 10毫摩尔氯化镁，0.25 μM BSA，2％甘油，30 mM氯化钠，4％DMSO和2毫摩尔ATP中进行。有些条件包括DTT或TCEP （三（2-羧乙基）膦）所指示。DNA结合是在Safire2酶标仪中测量荧光偏振（FP），使用以下设置：激发470 ± 5 nm，发射530 ± 5 nm，10测/孔，Z轴高度和G因子从对照孔自动校准。显示误差棒表示标准偏差。涉及蛋白质浓度的滴定实验中，数据拟合到该帐户用于协同性质由重组酶蛋白与DNA结合的方程式。对于涉及RI- 1的滴定实验中，蛋白质浓度为在不存在RI- 1得到的FP信号的〜80％的饱和度。 | ||||
| 细胞实验 | 细胞系 | HeLa, MCF-7和U2OS细胞 | ||
| 浓度 | ~35 μM | |||
| 孵育时间 | 24 小时 | |||
| 方法 | 细胞毒性是通过克隆形成能力的损失来确定。实验一式三份进行。结晶紫染色的菌落用CCD照相机成像，并使用NIH图像软件计数。误差线表示标准误差 | |||
化学信息&溶解度
| 分子量 | 361.61 | 分子式 | C14H11Cl3N2O3 |
| CAS号 | 415713-60-9 | SDF | Download RI-1 SDF |
| Smiles | C1COCCN1C2=C(C(=O)N(C2=O)C3=CC(=C(C=C3)Cl)Cl)Cl | ||
| 储存条件(自收到货起) | |||
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体外溶解度 |
DMSO : 50 mg/mL ( (138.27 mM) ；DMSO吸湿会降低化合物溶解度，请使用新开封DMSO) Water : Insoluble Ethanol : Insoluble |
摩尔浓度计算器 |
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体内溶解度 现配现用，请按从左到右的顺序依次添加，澄清后再加入下一溶剂 |
动物体内配方计算器 | ||||
实验计算
动物体内配方计算器（澄清溶液）
第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）
mg/kg
g
μL
只
第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系Selleck为您提供正确的澄清溶液配方）
% DMSO
%
% Tween 80
% ddH2O
%DMSO
%
计算结果：
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于μL DMSO溶液（母液浓度mg/mL，注：如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请先联系Selleck）；
体内配方配制方法：取μL DMSO母液，加入μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入μL ddH2O，混匀澄清。
体内配方配制方法：取μL DMSO母液，加入μL Corn oil，混匀澄清。
注意：1. 首先保证母液是澄清的；
2.一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
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