Fluorescein-5-isothiocyanate (FITC)

别名: Fluorescein isothiocyanate isomer I, 5-FITC

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目录号：S6928 Purity: 98.88%

Fluorescein-5-isothiocyanate (FITC, Fluorescein isothiocyanate isomer I, 5-FITC) 是一种能够与组织和蛋白质结合的荧光探针。

Fluorescein-5-isothiocyanate (FITC) Chemical Structure

CAS: 3326-32-7

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生物活性

产品描述	Fluorescein-5-isothiocyanate (FITC, Fluorescein isothiocyanate isomer I, 5-FITC) 是一种能够与组织和蛋白质结合的荧光探针。

体外研究(In Vitro)
体外研究活性	1.蛋白质制备 1) 为了获得最佳标记效果，请配制蛋白（抗体）浓度为2 mg/mL。 2) 蛋白质溶液的pH值为8.5±0.5。 pH值低于8.0时，用1m碳酸氢钠调节。 3）如果蛋白浓度低于2mg/ml，标记效率会大大降低。为了获得最佳的标记效率，建议最终蛋白浓度范围为2-10 mg/mL。 4) 蛋白缓冲液中必须不含伯胺（如Tris或甘氨酸）和铵离子，否则会影响标记效率。 2.染料制备将无水 DMSO 添加到 FITC 瓶中，制成 10 mM 储备溶液。通过移液或涡旋充分混合。 3.染料用量的计算反应所需FITC的量取决于待标记蛋白的量，FITC与蛋白的最佳摩尔比约为10。示例：假设所需标记蛋白为 1 mL 2 mg/mL IgG（MW=150,000），用 1 mL DMSO 溶解 1 mg FITC，则所需 FITC 体积为 40 μL。 4.进行缀合反应 1) 将大量新鲜制备的 10 mg/mL FITC 缓慢添加到 0.5 mL 蛋白质样品中。在溶液中，轻轻摇动混合，然后短暂离心，将样品收集在反应管底部。请勿充分混匀，以免蛋白质样品变性、失活。 2）将反应管置于暗处，室温下轻轻孵育，间隔60分钟。10-15分钟，轻轻翻转反应管数次，使两种反应物充分混合，提高棒效。 5.纯化结合体以下方案是使用 Sephadex G-25 柱纯化染料-蛋白质缀合物的示例。 1) 根据生产说明书准备Sephadex G-25柱。 2) 将反应混合物（来自“运行缀合反应”）加载到 Sephadex G-25 柱的顶部。 3) 当样品刚好流到顶部树脂表面下方时，立即添加 PBS (pH 7.2-7.4)。 4) 向所需样品中添加更多 PBS (pH 7.2-7.4) 以完成柱纯化。合并含有所需染料-蛋白质缀合物的级分。

NCT Number	Recruitment	Conditions	Sponsor/Collaborators	Start Date	Phases
临床试验信息 (data from https://clinicaltrials.gov, updated on 2024-05-22)
NCT05312411	Recruiting	Osteosarcoma	Seattle Children''s Hospital\|Umoja BioPharma Inc.	May 20 2022	Phase 1
NCT02743468	Completed	Polymorphism\|Lung Inflammation	National Institute of Environmental Health Sciences (NIEHS)\|National Institutes of Health Clinical Center (CC)	January 8 2019	--
NCT02878083	Terminated	ULCERATIVE COLITIS	Nantes University Hospital\|Takeda\|Mauna Kea Technologies\|Institut National de la Santé Et de la Recherche Médicale France	January 11 2017	Not Applicable

化学信息&溶解度

分子量	389.38	分子式	C₂₁H₁₁NO₅S
CAS号	3326-32-7	SDF	--
Smiles	OC1=CC2=C(C=C1)C3(OC(=O)C4=C3C=CC(=C4)N=C=S)C5=C(O2)C=C(O)C=C5
储存条件(自收到货起)	3年 -20°C(避光) 粉状	储备液保存和期限建议分装储备液，避免反复冻融！	1年-80°C溶于溶剂
储存条件(自收到货起)	3年 -20°C(避光) 粉状	储备液保存和期限建议分装储备液，避免反复冻融！	1个月-20°C溶于溶剂

体外溶解度
批次：

DMSO : 78 mg/mL ( (200.31 mM) ；DMSO吸湿会降低化合物溶解度，请使用新开封DMSO)

Ethanol : 10 mg/mL (25.68 mM)

Water : Insoluble

摩尔浓度计算器

体内溶解度
批次：

现配现用，请按从左到右的顺序依次添加，澄清后再加入下一溶剂

动物体内配方计算器

实验计算

摩尔浓度计算器

质量	浓度	体积	分子量
=	×	×

稀释计算器分子量计算器

动物体内配方计算器（澄清溶液）

第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）

给药剂量 mg/kg 动物平均体重 g 每只动物给药体积 μL 动物数量只

第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系Selleck为您提供正确的澄清溶液配方）

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH2O

%DMSO+ %

计算结果：

工作液浓度： mg/ml；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于μL DMSO溶液（母液浓度mg/mL，注：如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请先联系Selleck）；

体内配方配制方法：取μL DMSO母液，加入μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入μL ddH₂O，混匀澄清。

体内配方配制方法：取μL DMSO母液，加入μL Corn oil，混匀澄清。

注意：1. 首先保证母液是澄清的；
2.一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。

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