Fluorescein-5-isothiocyanate (FITC)

别名: Fluorescein isothiocyanate isomer I, 5-FITC

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Fluorescein-5-isothiocyanate (FITC, Fluorescein isothiocyanate isomer I, 5-FITC) 是一种能够与组织和蛋白质结合的荧光探针。

Fluorescein-5-isothiocyanate (FITC) Chemical Structure

Fluorescein-5-isothiocyanate (FITC) Chemical Structure

CAS: 3326-32-7

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批次: S692801 DMSO]78 mg/mL]false]Ethanol]10 mg/mL]false]Water]Insoluble]false 纯度: 98.88%
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生物活性

产品描述 Fluorescein-5-isothiocyanate (FITC, Fluorescein isothiocyanate isomer I, 5-FITC) 是一种能够与组织和蛋白质结合的荧光探针。
体外研究(In Vitro)
体外研究活性

1.蛋白质制备
1) 为了获得最佳标记效果,请配制蛋白(抗体)浓度为2 mg/mL。
2) 蛋白质溶液的pH值为8.5±0.5。 pH值低于8.0时,用1m碳酸氢钠调节。
3)如果蛋白浓度低于2mg/ml,标记效率会大大降低。 为了获得最佳的标记效率,建议最终蛋白浓度范围为2-10 mg/mL。
4) 蛋白缓冲液中必须不含伯胺(如Tris或甘氨酸)和铵离子,否则会影响标记效率。
2.染料制备
将无水 DMSO 添加到 FITC 瓶中,制成 10 mM 储备溶液。 通过移液或涡旋充分混合。
3.染料用量的计算
反应所需FITC的量取决于待标记蛋白的量,FITC与蛋白的最佳摩尔比约为10。
示例:假设所需标记蛋白为 1 mL 2 mg/mL IgG(MW=150,000),用 1 mL DMSO 溶解 1 mg FITC,则所需 FITC 体积为 40 μL。
4.进行缀合反应
1) 将大量新鲜制备的 10 mg/mL FITC 缓慢添加到 0.5 mL 蛋白质样品中。 在溶液中,轻轻摇动混合,然后短暂离心,将样品收集在反应管底部。 请勿充分混匀,以免蛋白质样品变性、失活。
2)将反应管置于暗处,室温下轻轻孵育,间隔60分钟。10-15分钟,轻轻翻转反应管数次,使两种反应物充分混合,提高棒效。
5.纯化结合体
以下方案是使用 Sephadex G-25 柱纯化染料-蛋白质缀合物的示例。
1) 根据生产说明书准备Sephadex G-25柱。
2) 将反应混合物(来自“运行缀合反应”)加载到 Sephadex G-25 柱的顶部。
3) 当样品刚好流到顶部树脂表面下方时,立即添加 PBS (pH 7.2-7.4)。
4) 向所需样品中添加更多 PBS (pH 7.2-7.4) 以完成柱纯化。
合并含有所需染料-蛋白质缀合物的级分。

NCT Number Recruitment Conditions Sponsor/Collaborators Start Date Phases
NCT05312411 Recruiting
Osteosarcoma
Seattle Children''s Hospital|Umoja BioPharma Inc.
May 20 2022 Phase 1
NCT02743468 Completed
Polymorphism|Lung Inflammation
National Institute of Environmental Health Sciences (NIEHS)|National Institutes of Health Clinical Center (CC)
January 8 2019 --
NCT02878083 Terminated
ULCERATIVE COLITIS
Nantes University Hospital|Takeda|Mauna Kea Technologies|Institut National de la Santé Et de la Recherche Médicale France
January 11 2017 Not Applicable

化学信息&溶解度

分子量 389.38 分子式

C21H11NO5S

CAS号 3326-32-7 SDF --
Smiles OC1=CC2=C(C=C1)C3(OC(=O)C4=C3C=CC(=C4)N=C=S)C5=C(O2)C=C(O)C=C5
储存条件(自收到货起) 3年 -20°C(避光) 粉状

体外溶解度
批次:

DMSO : 78 mg/mL ( (200.31 mM) ;DMSO吸湿会降低化合物溶解度,请使用新开封DMSO)

Ethanol : 10 mg/mL (25.68 mM)

Water : Insoluble

摩尔浓度计算器

体内溶解度
批次:

现配现用,请按从左到右的顺序依次添加,澄清后再加入下一溶剂

动物体内配方计算器

实验计算

摩尔浓度计算器

质量 浓度 体积 分子量

动物体内配方计算器(澄清溶液)

第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)

mg/kg g μL

第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶于水的药物;不同批次药物配方比例不同,请联系Selleck为您提供正确的澄清溶液配方)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

计算结果:

工作液浓度: mg/ml;

DMSO母液配制方法: mg 药物溶于μL DMSO溶液(母液浓度mg/mL,:如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请先联系Selleck);

体内配方配制方法:μL DMSO母液,加入μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入μL ddH2O,混匀澄清。

体内配方配制方法:μL DMSO母液,加入μL Corn oil,混匀澄清。

注意:1. 首先保证母液是澄清的;
2.一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。

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