ML323
ML323 是强效的选择性的USP1-UAF1抑制剂，其IC50为76 nM。
ML323 Chemical Structure
CAS: 1572414-83-5
产品质控
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| 相关靶点 | USP/UBP UCH | 点击展开 |
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相关信号通路图
生物活性
| 产品描述 | ML323 是强效的选择性的USP1-UAF1抑制剂，其IC50为76 nM。 | ||
|---|---|---|---|
| 特性 | USP1-UAF1选择性抑制剂。 | ||
| 靶点 |
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| 体外研究(In Vitro) | ||||
| 体外研究活性 | ML323通过抑制H596细胞中USP1–UAF1活性而抑制PCNA 和 FANCD2去泛素化。此外，ML323通过以两个主要的DNA损伤应答途径(TLS 和 FA)为靶点，增强顺铂在H596细胞和U2OS骨肉瘤细胞中的毒性。[1] |
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|---|---|---|---|---|
| 激酶实验 | 高通量筛选 | |||
| 对于HTS，USP1-UAF1活性使用泛素-罗丹明110为底物进行检测，泛素的C端甘氨酸和罗丹明之间的酰胺键水解作用导致荧光增加。该测定被小型化为4微升体积，在1,536孔中以定量的HTS模式筛选大约402,701种化合物，每种测试化合物以4到5种浓度范围测定。试验显示出很强的性能，整个筛选中因子Z的平均值为0.8。 | ||||
| 细胞实验 | 细胞系 | H596 细胞 | ||
| 浓度 | ~30 μM | |||
| 孵育时间 | 7-12天 | |||
| 方法 | 对于细胞集落形成实验，细胞以300–500细胞每孔接种于6孔板，并生长过夜。然后将细胞用单独的ML323，单独的顺铂或顺铂与ML323(1:1或 1:4)的组合以指示浓度处理。细胞用等体积的DMSO和生理盐水处理，作为对照组。处理48小时后，加入新鲜的生长培养基，细胞再培养5-10天以形成集落。对于UV联合治疗，细胞用指示浓度的ML323或等体积的DMSO处理。48小时后，移除培养基，细胞在254nm下以指示剂量被照射。加入新鲜生长培养基，细胞再培养5-10天以形成集落。没有被UV照射过，但被ML323或等体积DMSO处理过的细胞作为对照组，并指定为100%。细胞集落形成后，细胞用甲醇固定，并用0.5%结晶紫着色。大于50个细胞的集落被计数。集落的数量通过三个重复的板测定。剂量反应曲线使用GraphPad Prism产生，使用CalcuSyn计算复合指数进行分析。 |
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化学信息&溶解度
| 分子量 | 384.48 | 分子式 | C23H24N6 |
| CAS号 | 1572414-83-5 | SDF | Download ML323 SDF |
| Smiles | CC1=CN=C(N=C1NCC2=CC=C(C=C2)N3C=CN=N3)C4=CC=CC=C4C(C)C | ||
| 储存条件(自收到货起) | |||
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体外溶解度 |
DMSO : 76 mg/mL ( (197.66 mM) ；DMSO吸湿会降低化合物溶解度，请使用新开封DMSO) Ethanol : 38 mg/mL (98.83 mM) Water : Insoluble |
摩尔浓度计算器 |
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体内溶解度 现配现用，请按从左到右的顺序依次添加，澄清后再加入下一溶剂 |
动物体内配方计算器 | ||||
实验计算
动物体内配方计算器（澄清溶液）
第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）
mg/kg
g
μL
只
第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系Selleck为您提供正确的澄清溶液配方）
% DMSO
%
% Tween 80
% ddH2O
%DMSO
%
计算结果：
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于μL DMSO溶液（母液浓度mg/mL，注：如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请先联系Selleck）；
体内配方配制方法：取μL DMSO母液，加入μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入μL ddH2O，混匀澄清。
体内配方配制方法：取μL DMSO母液，加入μL Corn oil，混匀澄清。
注意：1. 首先保证母液是澄清的；
2.一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
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