Mirin
Mirin是有效的Mre11–Rad50–Nbs1(MRN)复合体抑制剂，能够抑制Mre11相关的外切酶活性。Mirin 可抑制MRN依赖的ATM的激活。
Mirin Chemical Structure
CAS: 1198097-97-0
产品质控
批次：
纯度：
99.79%
99.79
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相关信号通路图
生物活性
| 产品描述 | Mirin是有效的Mre11–Rad50–Nbs1(MRN)复合体抑制剂，能够抑制Mre11相关的外切酶活性。Mirin 可抑制MRN依赖的ATM的激活。 | ||
|---|---|---|---|
| 靶点 |
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| 体外研究(In Vitro) | ||||
| 体外研究活性 | Mirin抑制了DSB诱导的ATM活化，ATM依赖性的下游靶点Nbs1和Chk2的磷酸化以及MRN依赖性的ATM在Ser1981位点的自磷酸化。Mirin还抑制了TOSA4细胞的G2检查点以及HEK293细胞中同源依赖性的DNA修复。[1] 在整合有HPV16 (SiHa)的细胞中，Mirin增加了HPV episomes对PA25的敏感性，使PA25的IC50降低了5倍。[2] mirin的预处理还降低了cisplatin处理的293细胞的细胞活性并且抑制了增殖细胞核抗原的表达。[3] |
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|---|---|---|---|---|
| 激酶实验 | 核酶试验 | |||
| 寡聚核苷酸非发卡底物的反应液包含25 mM MOPS (pH 7.0，60 mM KCl，0.2% Tween 20，2 mM DTT，1 mM或5 nM MnCl2 (或者5 mM MgCl2，或者5 mM CaCl2)，0.1 pmol的DNA底物，以及0.3 pmol的Mre11 (或者相等数量的Mre11和Rad50混合物)终体积10 μl，37°C孵育30 min。然后加入SDS，EDTA和proteinase K使其终浓度分别达到0.2%，5 mM和0.1 mg/ml，继续孵育15 min。取4 μl的反应液与4 μl的甲酰胺loading buffer混合，然后放到含有10%丙烯酰胺和7 M尿素的凝胶中。电泳之后，用荧光成像系统分析。寡聚核苷酸发卡底物的反应液与非发卡底物基本相同，不同的是要加入3 pmolMre11以及反应条件是室温孵育过夜。非同源末端反应液包含25 mM MOPS (pH 7.0)，60 mM KCl，0.2% Tween 20，2 mM DTT，4 mM MgCl2，2 mM MnCl2，0.5 mM ATP，4 ng质粒DNA 10%聚乙烯乙二醇，0.01 pmol人源DNA连接酶I，以及0.06 pmol Mre11或者0.1单位E. coli 外切酶 III，终体积10 μl。在37°C孵育25 min后，加入Tween 20使其终浓度达到0.5%，用引物DAR5和DAR147进行PCR扩增。PCR的产物用TA cloning kit克隆并且用自动的ABI Capillary Genetic Analyzer进行测序。 | ||||
| 细胞实验 | 细胞系 | HEK 293 cells | ||
| 浓度 | 100 μM | |||
| 孵育时间 | 24 h | |||
| 方法 | 人源胚胎肾细胞HEK293用添加有5热灭活胎牛血清，青霉素(100 U/mL)，链霉素(100 mg/mL)的RPMI-1640培养基在含有5% CO2，37 °C的条件下进行培养。每个48小时更换新的培养基。细胞接种到96-孔板上，用mirin（100 μM）预处理一小时，然后加入cisplatin后再孵育8小时和24小时。然后利用EZ-Cytox cell viability assay kit进行MTT测试，MTT的降低值用酶标仪在450 nm波长下进行测定。 |
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| 实验图片 | 检测方法 | 检测指标 | 实验图片 | PMID |
| Growth inhibition assay | Cell viability |
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18176557 | |
化学信息&溶解度
| 分子量 | 220.25 | 分子式 | C10H8N2O2S |
| CAS号 | 1198097-97-0 | SDF | Download Mirin SDF |
| Smiles | OC1=CC=C(C=C1)\C=C2/SC(=N)NC2=O | ||
| 储存条件(自收到货起) | |||
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体外溶解度 |
DMSO : 44 mg/mL ( (199.77 mM) ；DMSO吸湿会降低化合物溶解度，请使用新开封DMSO) Water : Insoluble Ethanol : Insoluble |
摩尔浓度计算器 |
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体内溶解度 现配现用，请按从左到右的顺序依次添加，澄清后再加入下一溶剂 |
动物体内配方计算器 | ||||
实验计算
动物体内配方计算器（澄清溶液）
第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）
mg/kg
g
μL
只
第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系Selleck为您提供正确的澄清溶液配方）
% DMSO
%
% Tween 80
% ddH2O
%DMSO
%
计算结果：
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于μL DMSO溶液（母液浓度mg/mL，注：如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请先联系Selleck）；
体内配方配制方法：取μL DMSO母液，加入μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入μL ddH2O，混匀澄清。
体内配方配制方法：取μL DMSO母液，加入μL Corn oil，混匀澄清。
注意：1. 首先保证母液是澄清的；
2.一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
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