Cy7

别名: Sulfo-Cyanine7

Cy7 (Sulfo-Cyanine7)是一种荧光标记染料,用于标记蛋白质、抗体、多肽和寡核苷酸。

Cy7 Chemical Structure

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CAS: 943298-08-6

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生物活性

产品描述 Cy7 (Sulfo-Cyanine7)是一种荧光标记染料,用于标记蛋白质、抗体、多肽和寡核苷酸。
体外研究(In Vitro)
体外研究活性

1.蛋白质制备
1) 为了获得最佳标记效果,请配制蛋白(抗体)浓度为2 mg/mL。
2) 蛋白质溶液的pH值为8.5±0.5。 若pH低于8.0,则需用1M碳酸氢钠调节。
3)如果蛋白浓度低于2 mg/mL,标记效率会大大降低。 为了获得最佳的标记效率,建议最终蛋白浓度范围为2-10 mg/mL。
4) 蛋白缓冲液中必须不含伯胺(如Tris或甘氨酸)和铵离子,否则会影响标记效率。
2.染料制备(以CY3-NHS酯为例)
将无水 DMSO 添加到 CY3-NHS 酯小瓶中,制成 10 mM 储备溶液。 通过移液或涡旋充分混合。
3.染料用量的计算
反应所需的CY3-NHS酯的量取决于待标记的蛋白质的量,CY3-NHS酯与蛋白质的最佳摩尔比约为10。
举例:假设所需标记蛋白为500 μL 2 mg/mL IgG(MW=150,000),用100 μL DMSO溶解1 mg CY3-NHS酯,则所需CY3-NHS酯体积为5.05 μL,详细计算过程为 如下:
1) mmol (IgG) = mg/mL (IgG) ×mL (IgG) / MW (IgG) =2 mg/mL × 0.5 mL / 150,000 mg/mmol= 6.7×10-6 mmol
2) 毫摩尔(CY3-NHS酯) = 毫摩尔(IgG) × 10 = 6.7×10-6 毫摩尔×10 = 6.7 × 10-5 毫摩尔
3) μL(CY3-NHS酯)=mmol(CY3-NHS酯)×MW(CY3-NHS酯)/mg/μL(CY3-NHS酯)=6.7×10-5mmol×753.88mg/mmol/0.01mg /μL = 5.05 μL(CY3-NHS 酯)
4.进行缀合反应
1) 将大量新鲜制备的 10 mg/mL CY3-NHS 酯缓慢添加到 0.5 mL 蛋白质样品中
在溶液中,轻轻摇动混合,然后短暂离心,将样品收集在反应管底部。 不要充分混合,以免蛋白质样品变性和失活。
2)将反应管置于暗处,室温下轻轻孵育,间隔60分钟。10-15分钟,轻轻翻转反应管数次,使两种反应物充分混合,提高棒效。
5.纯化结合体
以下方案是使用 SepHadex G-25 柱纯化染料-蛋白质缀合物的示例。
1) 根据生产说明准备 SepHadex G-25 柱。
2) 将反应混合物(来自“运行缀合反应”)加载到 SepHadex G-25 柱的顶部。
3) 当样品刚好流到顶部树脂表面下方时,立即添加 PBS (pH 7.2-7.4)。
4) 向所需样品中添加更多 PBS (pH 7.2-7.4) 以完成柱纯化。 合并含有所需染料-蛋白质缀合物的级分。

化学信息&溶解度

分子量 682.85 分子式

C35H42N2O8S2

CAS号 943298-08-6 SDF --
储存条件(自收到货起) 3年 -20°C 粉状

体外溶解度
批次:

DMSO : 100 mg/mL ( (146.44 mM) ;DMSO吸湿会降低化合物溶解度,请使用新开封DMSO)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

摩尔浓度计算器

体内溶解度
批次:

现配现用,请按从左到右的顺序依次添加,澄清后再加入下一溶剂

动物体内配方计算器

实验计算

摩尔浓度计算器

质量 浓度 体积 分子量

动物体内配方计算器(澄清溶液)

第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)

mg/kg g μL

第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶于水的药物;不同批次药物配方比例不同,请联系Selleck为您提供正确的澄清溶液配方)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

计算结果:

工作液浓度: mg/ml;

DMSO母液配制方法: mg 药物溶于μL DMSO溶液(母液浓度mg/mL,:如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请先联系Selleck);

体内配方配制方法:μL DMSO母液,加入μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入μL ddH2O,混匀澄清。

体内配方配制方法:μL DMSO母液,加入μL Corn oil,混匀澄清。

注意:1. 首先保证母液是澄清的;
2.一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。

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